基于错配堆积的无酶循环回路的比色生物传感器检测microRNA

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利用耦合自发的级联催化茎环自组装回路和错配的茎环,建立起一种用于高特异、高灵敏地检测 microRNA的比色生物传感策略。该策略由两层催化茎环自组装反应构成。当靶物质 microRNA存在于检测体系中时,microRNA可引起茎环立足点的置换反应,进而形成第一层催化茎环自组装反应,该反应可以产生中间产物,同时释放出靶物质microRNA。接着,中间产物能作为触发器,触发第二层催化茎环自组装反应,该反应可同时循环释放出中间产物,循环催化第二层反应。最后,第二层催化茎环自组装反应产生的最终产物包含有游离的富 G序列,它能与氯化血红素结合形成G-四链体-氯化血红素DNA酶,它具有辣根过氧化物酶类似的催化活性,能够催化底物,产生肉眼颜色变化或者比色信号。通过对实验条件的优化,在最佳实验条件下,该生物传感器可实现对靶物质在线性范围100 fM到10 nM的检测,其检测限为36.2 fM,同时也能较高选择性地区分出错配的microRNA。另外,该传感器被用于检测硅鱼精样本中的microRNA,同样展示出了较好的分析性能。因此,该生物传感策略在将来或许能为生物医学研究中microRNA的检测提供选择。
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