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目的趋化因子受体CXCR4参与了外周血免疫细胞介导的各种炎症疾病,包括类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)、间质性肺病(Interstitial lung diseases,ILD)和炎症性肠病。RA是一类以自身免疫系统紊乱、关节病变为主的慢性疾病。在RA患者中,ILD是最常见最严重的关节外病变之一。研究表明CXCR4及其配体CXCL12介导了免疫细胞向关节和肺组织的异常渗透。目前,有关RA相关ILD(RA-associatedILD,RA-ILD)的临床报道很多,但是关于RA-ILD发病机制的研究报道非常的少,缺乏适合的动物疾病模型是原因之一。本研究首先建立了小鼠胶原诱导型关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型,并进一步的发现小鼠关节炎的发生和发展会导致肺部炎症的产生,并对该模型是否能够作为研究RA-ILD的动物模型进行评估;其次,建立了小鼠淋巴细胞CXCR4条件性敲除(conditionknockout,CKO)模型,在该CKO小鼠的基础上同时建立CIA模型,对CXCR4在RA-ILD中的发病机制进行了初步的探究。方法(1)用CXCR4flox/flox基因型小鼠和Mx1-cre基因型小鼠进行杂交,杂交后代中的CXCR4flox/+/Mx1-cre基因型小鼠又作为亲本进行新一轮的自交和繁殖,利用PCR技术进行基因型分型鉴定,获得CXCR4flox/flox/Mx1-cre基因型小鼠。(2)通过注射诱导剂PI:PC,在CXCR4flox/flox/Mx1-cre基因型小鼠基础上进一步建立淋巴细胞CXCR4 CKO的遗传模型。(3)通过注射鸡II型胶原蛋白和完全弗氏佐剂混合的乳剂,建立野生型C57BL/6小鼠CIA模型,分析小鼠关节和肺组织的病变情况。(4)在淋巴细胞CXCR4条件性敲除小鼠上建立CIA模型,对关节和肺组织的病变进行分析,并且利用流式细胞术对T、B淋巴细胞的数量和比例的变化进行分析。结果(1)成功的获得用于外周血淋巴细胞CXCR4敲除的CXCR4flox/flox/Mx1-cre基因型小鼠。(2)注射PI:PC后,在CXCR4flox/flox/Mx1-cre基因型小鼠上成功的构建了外周血淋巴细胞CXCR4CKO小鼠模型。(3)利用完全弗氏佐剂(CFA)与鸡IⅡ型胶原蛋白的混合乳剂免疫野生型小鼠,成功的在小鼠上建立了 CIA模型,并发现小鼠CIA模型的肺部存在炎症症状,即我们已成功建立RA-ILD模型。(4)与对照组相比,淋巴细胞CXCR4CKO小鼠关节组织内的滑膜增生减少、炎症细胞的浸润降低,同时肺组织中炎症细胞的渗透大量的减少、炎症因子的表达显著降低,此结果表明淋巴细胞CXCR4的敲除,不仅对CIA小鼠发生的关节炎起到一定的缓解作用,同时对CIA小鼠的肺组织的炎症也有着明显的改善。(5)在小鼠CIA发病的过程中,对照组小鼠的T淋巴细胞在高峰期有着显著的升高,从高峰期到恢复期出现下降,而CXCR4敲除小鼠T淋巴细胞并未出现明显的变化;对照组小鼠的B淋巴细胞数量在高峰期有着显著的降低,从高峰期到恢复期出现升高,而CXCR4敲除小鼠B淋巴细胞并未明显的降低。结论小鼠CIA模型除了可以用来研究RA外,同时也可以作为一种用于研究RA-ILD的动物疾病模型。外周血T淋巴细胞和B淋巴细胞参与了 RA-ILD的发病过程,而CXCR4介导的外周血淋巴细胞在RA-ILD的发生和发展中起到非常关键的作用。