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杂色鲍(Haliotisdiversicolor),又称九孔鲍,是我国福建南部和广东等沿海地区鲍养殖的重要品种,商业价值较高,杂色鲍繁殖调控对于其人工育苗和育种都有重要意义,但目前有关鲍的繁殖分子机制研究却十分有限,尤其是对鲍的产卵和排精机制了解更少。本文通过组织学、分子生物学和生物化学方法对杂色鲍的前列腺素E2(PGE2)、PGE2合成相关的三种酶基因和EP4受体进行了研究,并结合生态实验讨论了PGE2在杂色鲍繁殖中的作用。主要结果如下: 1.PGE2在杂色鲍繁殖中功能研究 杂色鲍卵巢和精巢PGE2的含量分别254.2~599.1 pg/g、316.1~384.5 pg/g。PGE2的含量从杂色鲍卵巢的生长期开始逐渐增加,到成熟期达到最大(P<0.05),排放期又下降,但在杂色鲍精巢的生长期、成熟期和排放期,PGE2的含量没有显著的差异。用一定量的PGE2注射性腺成熟的杂色鲍,结果发现注射PGE2组配子的排放率约为生理盐水组的两倍。总的来说,PGE2与杂色鲍的繁殖有关,在杂色鲍的性腺发育和配子排放的过程中发挥了重要作用。 2.杂色鲍中PGE2合成相关基因的克隆与表达研究 克隆获得了杂色鲍PGE2合成相关的三种酶cPLA2、COX2和PGES2基因及EP4受体基因,其中PGES2和EP4基因的cDNA全长分别为1592和2453 bp,各自编码393和486个氨基酸;cPLA2和COX2基因cDNA的部分序列分别为1489和671bp,各自编码329和223个氨基酸。在雌性杂色鲍催产过程中,除了PGES2基因,其他三个基因在UV组的表达量明显升高(P<0.05),而在雄性杂色鲍催产的过程中,除了cPLA2基因在UV组表达量显著提高(P<0.05),其他三个基因在各个组中都没有显著差异。原位杂交结果显示除了COX2,其他三个基因均表达在卵巢的滤泡腔的滤泡细胞中。