龙须藤总黄酮分散片的处方优化及质量标准研究

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目的:龙须藤为豆科羊蹄甲属植物龙须藤[Bauhinia championii(Benth.)Benth.]的干燥藤茎,具有祛风除湿、行气活血等功效,常用于治疗风湿痹痛、中风偏瘫、胃脘胀痛、跌打损伤等症。大量研究表明龙须藤药材中的黄酮类化合物是龙须藤抗炎镇痛、治疗类风湿性关节炎的有效成分。本文把从龙须藤药材中提取分离得到的龙须藤总黄酮与适宜的辅料结合,制成龙须藤总黄酮分散片,期望可以降低药物的服用量、提高药物生物利用度。采用星点设计-效应面法,优选龙须藤总黄酮分散片的处方,为制备出质量合格的制剂提供实验依据。方法:①使用SD大鼠建立膝关节炎症模型,以炎症指标如关节直径、足趾容积作为药物抗炎作用的依据。通过药效学跟踪试验,参考龙须藤的不同浓度乙醇提取物对膝关节炎症模型大鼠的抗炎作用,选取龙须藤的最佳乙醇提取浓度,采用硅胶柱层析法从龙须藤乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到龙须藤总黄酮。②采用RP-HPLC法,测定龙须藤总黄酮中3’,4’-亚甲二氧基-5’,5,6,7-四甲氧基黄酮和3’,4’,5’,5,7-五甲氧基黄酮的含量。③以药用辅料对龙须藤总黄酮分散片的成型性、分散均匀性及崩解时限的影响进行单因素考察,选取适宜的填充剂、崩解剂、崩解剂加入方式、润湿剂、润滑剂;选取其中影响较大的因素作为考察因素,以崩解时限和分散均匀度为指标,通过星点设计试验优选龙须藤总黄酮分散片的处方工艺。④参照《中国药典》2010年版制剂通则(附录ⅠD片剂)项下对分散片进行检查;采用薄层色谱法对龙须藤总黄酮分散片进行定性鉴别;采用RP-HPLC法,测定分散片中3’,4’-亚甲二氧基-5’,5,6,7-四甲氧基黄酮和3’,4’,5’,5,7-五甲氧基黄酮的含量,并制定龙须藤总黄酮分散片的质量标准。结果:①在大鼠膝关节腔内注射浓度为1 mg/m L碘乙酸钠溶液进行膝关节炎症模型的复制,注射量为0.1 m L/只,该造模方法简便易行,炎症指标变化显著,便于观察。龙须藤的70%乙醇浸膏抗炎作用最好,采用溶剂系统为二氯甲烷/乙酸乙酯(8/1~4/1)梯度洗脱分离龙须藤总黄酮的方法可行。②龙须藤总黄酮中3’,4’-亚甲二氧基-5’,5,6,7-四甲氧基黄酮、3’,4’,5’,5,7-五甲氧基黄酮含量分别为21.3%、46.7%。③采用单因素试验及星点设计-效应面试验,以片剂的外观性状、片重差异和崩解时限、分散均匀性为指标优选分散片处方,最优处方工艺为:龙须藤总黄酮用量为6.6%,填充剂为乳糖和MCC联合使用(乳糖用量为18.4%,MCC用量为64.0%),崩解剂CMS-Na用量为10.0%,润滑剂滑石粉用量为1%,崩解剂加入方式为内加法,润湿剂为90%乙醇适量。④按最优处方制得的3批龙须藤总黄酮分散片的重量差异检查、分散均匀性检查、崩解时限检查、溶出度检查均符合2010版《中国药典》规定,平均崩解时间为31.2 s,体外累计溶出度30 min内已经达到70%,均符合2010版《中国药典》规定,薄层定性鉴别呈阳性,RP-HPLC法测定3’,4’-亚甲二氧基-5’,5,6,7-四甲氧基黄酮和3’,4’,5’,5,7-五甲氧基黄酮含量为分别为4.23 mg/片、8.89 mg/片。结论:①分离得到的龙须藤总黄酮对膝关节炎症模型大鼠的抗炎作用显著,具有良好的应用前景。②使用星点设计-效应面法优选得到的龙须藤总黄酮分散片的处方工艺较为稳定,可以到达速崩要求。③建立龙须藤总黄酮分散片的质量标准,为龙须藤总黄酮分散片的质量控制提供实验依据。
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