半乳糖凝集素1,3在不明原因不孕症子宫内膜、正常子宫内膜及早孕蜕膜中的表达及意义的研究

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目的:不明原因不孕症是指经过不孕症的详细检查,依靠现今检查方法尚未发现明确原因的不孕症,约占总不孕人群的10﹪。受精卵着床窗口期子宫内膜容受性欠佳,受精卵着床障碍可能是妇女不明原因不孕的主要原因之一。受精卵着床(implantation)是指晚期胚泡植入子宫内膜的过程。受精卵着床必须具备4个条件:1、透明带消失2、胚泡内滋养细胞必须分化出合体滋养细胞3、胚泡和子宫内膜必须发育同步且功能协调,子宫有一个极短的敏感期,允许受精卵着床;孕妇体内有足量的孕酮。其中子宫内膜和胚泡的同步发育,即子宫内膜达到接受态、胚泡达到植入态,是受精卵着床最重要的条件,子宫内膜接受胚泡着床的能力即为子宫内膜容受性。对于人类,只有在月经周期特定而短暂的时期即月经周期的第20-24天[1],子宫内膜才具备接受胚泡植入的能力,此时子宫内膜的容受性最佳,这个时期称为“着床窗口期”。子宫内膜容受性的好坏是胚泡植入的决定性因素,也是胚泡植入调节的研究基础。半乳糖家族是一种具有一个或多个特异识别半乳糖结构的蛋白质,其参与多种生理和病理过程,如调节细胞的粘附,凋亡,免疫调节及肿瘤的转移等。成功的妊娠与子宫内膜的容受性有关,子宫内膜的容受性的改变是不明原因不孕的原因之一。半乳糖凝集素1,3(Galectin-1、3)在滋养细胞中表达,参与到胚泡种植的过程中,其通过多种途径调节子宫内膜的容受性,其可以作为评价子宫内膜容受性的指标之一。本实验在基因和蛋白水平检测galectin-1,3在人类不明原因不孕症患者子宫内膜、正常子宫内膜及早孕蜕膜中的表达情况,为临床上不明原因不孕症的诊疗提供理论依据。方法:选取2010.10年到2011.11年在河北医科大学第二附属医院妇产科门诊就诊的女性不孕症患者,于宫腔镜下取其内膜组织,病理证实为正常子宫内膜组织,除外已知不孕原因,临床诊为不明原因不孕症(婚后有正常性生活未避孕,同居两年未受孕者)40例,其中增殖晚期(月经周期的第11-15天)子宫内膜20例,分泌中期子宫内膜(月经周期的第20—24天)20例。选择同期因正常分娩后一年内上环者10例,有正常妊娠史者因卵巢单纯囊肿或卵巢冠囊肿住院行手术治疗者30例,取其子宫内膜组织,病理证实为正常子宫内膜组织者,其中增殖晚期子宫内膜20例,分泌中期子宫内膜20例。选择同期因非意愿妊娠自愿要求终止妊娠早孕者(≤12周)蜕膜组织40例。采用逆转录聚合酶链反应半定量技术(RT-PCR)和免疫组织化学法分别对全部标本组织中galectin-1,3mRNA和蛋白表达水平进行检测,结果采用SPSS13.0软件包进行数据分析。结果1galectin-1,3mRNA在不明原因不孕症患者子宫内膜,正常子宫内膜及正常早孕蜕膜中均有不同程度的表达。2galectin-1,3蛋白主要表达在细胞浆中,在细胞核可见少量表达。阳性染色为细胞浆或者细胞核中出现棕色或褐色颗粒。galectin-1,3蛋白在不明原因不孕症患者子宫内膜,正常子宫内膜及早孕者蜕膜中均有不同程度的表达。3在正常子宫内膜组织中,galectin-1,3mRNA及蛋白在分泌中期子宫内膜中表达明显高于增生晚期,差异有统计学意义(P<0.05),而在不明原因不孕症患者子宫内膜组织中,galectin-1,3mRNA及蛋白在分泌中期子宫内膜中的表达与增生晚期相比无差异,差异无统计学意义(P>0.05)。4galectin-1,3mRNA及蛋白在蜕膜组织中表达明显高于未孕者子宫内膜组织,差异有统计学意义(P<0.05)。5galectin-1,3mRNA及蛋白的表达顺序,由低到高:不明原因不孕症组<正常子宫内膜组<早孕组,差异均有统计学意义(P<0.05)。6galectin-1,3mRNA在各组中的表达呈正相关性,且galectin-3mRNA及蛋白的表达高于galectin-1mRNA,差异具有统计学意义。结论1galectin-1,3mRNA及蛋白在蜕膜组织中表达明显高于未孕者子宫内膜组织,提示galectin-1,3蛋白是与妊娠密切相关的一种蛋白质。2galectin-1,3mRNA及蛋白在分泌中期(即着床期)表达明显高于增生晚期,表达呈时空性,说明galectin-1,3蛋白参与调节受精卵围着床期子宫内膜的容受性。3galectin-1,3mRNA及蛋白在不明原因不孕症者子宫内膜中的表达低于同期在正常子宫内膜中的表达,说明galectin-1,3蛋白与不明原因不孕症密切相关,其可能是通过影响子宫内膜容受性而影响受精卵着床。4本实验只是证明在不明原因不孕症中galectin-1,3mRNA和蛋白表达低下或者缺陷,但是galectin-1,3蛋白是否可以引起不孕需要进一步研究。5对galectin-1,3蛋白在胚泡着床及胚胎发育过程中与子宫内膜容受性关系的研究,可能为不明原因引起的不孕诊疗提供依据。6galectin-1,3与子宫内膜容受性密切相关,但是目前其具体调节机制有待进一步研究及论证。
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