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目的:探究d-δ-生育酚对人晶状体上皮SRA细胞生长的影响以及相关分子机制,为d-δ-生育酚用于治疗与预防后发性白内障提供实验依据。
方法:实验分为6组,即空白对照组(0μmol/L)及实验组,即5个不同浓度的d-δ-生育酚(40、60、80、100、120μmol/L)分别处理人晶状体上皮SRA细胞24h、48h、72h,噻唑兰(MTT)法检测各组细胞的增殖抑制率。细胞培养48h,在倒置显微镜下观察人晶状体上皮SRA细胞形态。SRA细胞培养48h,流式细胞仪检测细胞周期,蛋白印迹法(Western Blot)检测bcl-2、bax、CyclinD1、P21蛋白表达。
结果:①SRA细胞形态学发生改变,随着d-δ-生育酚的浓度逐渐增加,SRA细胞较对照组细胞明显减少,细胞密度逐渐变低。②d-δ-生育酚抑制人晶状体上皮细胞增殖,增殖抑制率与d-δ-生育酚的浓度呈正相关(P<0.001)。③d-δ-生育酚阻滞SRA细胞于S期,随浓度的增大阻滞作用增强,差异有统计学意义(P<0.01)。④d-δ-生育酚下调SRA细胞P21、bcl-2和CyclinD1表达,差异有统计学意义(P<0.05);上调bax表达,差异有统计学意义(P<0.01)。
结论:①d-δ-生育酚能明显抑制人晶状体上皮SRA细胞的增殖,阻滞细胞周期于S期。②d-δ-生育酚抑制人晶状体上皮SRA细胞的增殖可能是通过抑制bcl-2、P21、CylinD1的表达,诱导bax的表达实现的。
方法:实验分为6组,即空白对照组(0μmol/L)及实验组,即5个不同浓度的d-δ-生育酚(40、60、80、100、120μmol/L)分别处理人晶状体上皮SRA细胞24h、48h、72h,噻唑兰(MTT)法检测各组细胞的增殖抑制率。细胞培养48h,在倒置显微镜下观察人晶状体上皮SRA细胞形态。SRA细胞培养48h,流式细胞仪检测细胞周期,蛋白印迹法(Western Blot)检测bcl-2、bax、CyclinD1、P21蛋白表达。
结果:①SRA细胞形态学发生改变,随着d-δ-生育酚的浓度逐渐增加,SRA细胞较对照组细胞明显减少,细胞密度逐渐变低。②d-δ-生育酚抑制人晶状体上皮细胞增殖,增殖抑制率与d-δ-生育酚的浓度呈正相关(P<0.001)。③d-δ-生育酚阻滞SRA细胞于S期,随浓度的增大阻滞作用增强,差异有统计学意义(P<0.01)。④d-δ-生育酚下调SRA细胞P21、bcl-2和CyclinD1表达,差异有统计学意义(P<0.05);上调bax表达,差异有统计学意义(P<0.01)。
结论:①d-δ-生育酚能明显抑制人晶状体上皮SRA细胞的增殖,阻滞细胞周期于S期。②d-δ-生育酚抑制人晶状体上皮SRA细胞的增殖可能是通过抑制bcl-2、P21、CylinD1的表达,诱导bax的表达实现的。