巴豆提取物对小菜蛾的生物活性研究

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本试验以巴豆(Croton tiglium)提取物对小菜蛾(Plutella xylostella L.)的生物活性进行了研究,得到了拒食活性较高的组分,并以巴豆粗提物对小菜蛾进行了胃毒、生长发育抑制和产卵忌避等作用方式的研究,获得了如下研究成果。1、以工业酒精为溶剂,用超声波细胞粉碎机进行振荡提取,得到巴豆粗提物。其提取率为19.59%。浓度为10mg/ml的巴豆粗提物乙醇溶液对小菜蛾的选择性拒食率为73.84%。2、巴豆粗提物对小菜蛾3龄幼虫的拒食活性随浓度的增加而增强,回归方程为y=1.6787+4.0459(r=0.9725),拒食中浓度AFC50为3.70±0.33mg/ml。3、巴豆粗提物对小菜蛾幼虫有明显的生长发育抑制作用。抑制效果随溶液浓度的增大而增大,回归方程为y=1.6473x+3.9876(r=0.9354),抑制中浓度AGC50为4.12±0.36mg/ml。4、巴豆粗提物对小菜蛾成虫有较强的产卵忌避作用,产卵忌避效果随溶液浓度的增大而增大,回归方程为y=1.6905x+3.9172(r=0.9850),产卵忌避中浓度AOC50为4.37±0.37mg/ml。5、巴豆粗提物对小菜蛾幼虫的触杀和胃毒作用不明显。6、取巴豆粗提物稠膏,加10倍量的蒸馏水200ml,装入分液漏斗中,采用液—液分配,依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯和水萃取,最后分别将这些萃取液减压浓缩至稠膏。浓度为10mg/ml的石油醚、乙醚、乙酸乙酯和水的萃取物乙醇溶液对3龄小菜蛾幼虫的选择性拒食率分别为84.99%、29.56%、17.98%和6.78%。其中石油醚萃取物浓度为10 mg/ml的乙醇溶液对小菜蛾3龄幼虫选择性拒食率相对巴豆粗提物相同浓度乙醇溶液提高了11.15%。7、将巴豆石油醚萃取物进行柱层析分离,以硅胶为固定相,以石油醚、乙酸乙酯和甲醇为流动相进行梯度洗脱。其中石油醚:乙酸乙酯(50:50),乙酸乙酯:甲醇(90:10)的洗脱合并物(流分I)浓度为10 mg/ml的乙醇溶液对小菜蛾3龄幼虫选择性拒食率最高,为97.39%,较前一过程提高了12.4%。8、将柱层析中拒食活性最高的流分进行薄层层析分离,以硅胶为载体,以石油醚:乙酸乙酯:乙醇=10:3:1(V/V/V)为展开剂进行分离。共得到3条带,其中中间的条带(I-2)浓度为10 mg/ml的乙醇溶液对小菜蛾3龄幼虫选择性拒食率最高,为99.65%,较前一过程提高了2.26%。
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