论文部分内容阅读
动脉粥样硬化血栓性脑梗死(atherothromboticcerebralinfarction，简称动脉硬化性脑梗死，以下简称脑梗死，cerebralinfarction，CI)的发病机制复杂，其中遗传因素日益受到关注。动脉粥样硬化是CI发生的重要因素之一，而脂质代谢障碍在动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)的形成和发展中扮演着重要的角色，并且与CI的发生有重要的联系；脂蛋白脂酶(lipoproteinlipase，LPL)是血浆甘油三酯代谢的关键酶之一，与脂质水平及其代谢异常、AS、CI的发生有着重要的联系，在脂质代谢中起着重要的作用，因而在脂质代谢疾病和动脉粥样硬化及脑血管病的遗传倾向性研究中有着重要的研究价值。目前国内外对LPL基因多态性的研究多集中于单纯与脂质代谢异常或AS关系的研究，与CI关系的报道甚少，不同基因型对脂质代谢异常、AS以及CI的影响尚不清楚，其结果存在着较大的争议，而且不同地区、不同种族的研究结果亦有较大差别，本研究拟探讨LPLHindⅢ、PvuⅡ、Ser447Ter三种基因多态性在CI组病人中的分布，结合颈动脉超声多普勒对颈总动脉内膜中层厚度(intima-mediathickness，IMT)和颈动脉斑块(carotidarteryplaque，CAP)的检查，研究LPL相关位点基因多态性与血脂变化、颈总动脉IMT及CAP与CI之间的相互关系，了解汉族人群中LPL基因多态性在CI人群中的分布，探讨基因型与表型之间的内在联系，研究CI发生的分子遗传学机制，及遗传因素对脑梗死的作用机理，这对早期发现动脉硬化性脑梗死的高危人群，有效防治CI具有重要意义。
材料与方法1、研究对象：为广东地区自然人群，饮食结构相似，各研究对象之间无血缘关系。CI组为临床确诊的CI患者166例，并根据统一标准进行分组、分型；对照组共72例，为性别、年龄与CI组匹配的同期门诊体检正常人。
2、人外周血白细胞DNA的提取：静脉血2ml，EDTA抗凝，采用北京赛百胜公司的DNA抽提试剂盒，抽提基因组DNA。
3、常规取空腹血样送广医二院检验科全自动生化仪检测血脂及血中BUN、CR、UA等相关生化指标。
4、颈动脉超声检测，由广州医学院第二附属医院超声诊断科医师专人操作，测定双侧颈总动脉IMT和双侧颈动脉斑块。
5、参考文献设计引物，分别扩增LPL基因HindⅢ、PvuⅡ、Ser447Ter目标基因片断，分别用HindⅢ、PvuⅡ、MnlⅠ内切酶酶切，琼脂糖凝胶电泳观察判断相应的基因型。
6、统计学分析：用SPSS12.0统计软件进行分析处理。
结果：1、血脂、CCAIMT、颈动脉斑块与CI的关系CI组血浆总胆固醇(TC)和载脂蛋白B(apoB)含量明显高于对照组，经Logistic回归分析显示吸烟是CI的危险因素(OR=3.488，P=0.016)，血浆TC增高也是CI的危险因素(OR=3.091，P=0.012)。
2、LPL基因HindⅢ多态性与血脂、AS及CI的关系在CI组中H+H+基因型频率高于对照组(OR=2.267，P=0.004)，H+等位基因频率明显高于对照组(P=0.004)；H+H+基因型在CI轻型组和中重型的分布频率显著高于对照组(OR1=2.160，P1=0.025；OR2=2.083，P2=0.020)；Logistic回归分析发现H+H+基因型的OR值达2.629，为CI的独立危险因素。
3、LPL基因PvuⅡ多态性与血脂、AS及CI的关系在CI组中P+P+基因型血甘油三酯(TG)升高、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)的水平降低，与P-P+、P-P-基因型相比，差异具非常显著意义(P1=0.000，P2=0.001)，P+P+基因型频率高于对照组(P=0.002)，P+等位基因频率高于对照组(P=0.000)；轻型组和中重型P+P+基因型频率显著高于对照组(OR1=3.509，P1=0.000；OR2=2.170，P2=0.021)；小血管受累组和大血管受累组P+P+基因型频率均显著高于对照组(OR1=2.747，P1=0.001；OR2=2.371，P2=0.040)。
4、LPL基因Ser447Ter多态性与血脂、AS及CI的关系CI组CG+GG基因型TG含量比CC基因型明显降低(P=0.009)，HDL-c含量明显增高(P=0.005)，CG+GG基因型频率低于对照组(OR=0.462，P=0.041)；G等位基因频率CI组低于对照组(P=0.014)，在CI轻型组和重型组中CG+GG基因型显著低于对照组(P1=0.000，P2=0.018)。
结论1、血脂代谢异常与动脉粥样硬化关系密切，血TC增高是CI的危险因素。2、LPLHindⅢ基因多态性与血脂水平无明显相关性，与CI的关系密切，H+H+基因型是CI的危险因素。
3、LPLPvuⅡ基因多态性对血脂水平的影响明显，P+P+基因型可引起血TG升高、HDL-c降低；P+P+基因型在CI组内的分布频率高，可能是CI的易感基因型。4、LPLSer447Ter基因多态性与血脂及CI的关系密切，G等位基因可引起血TG升高、HDL-c降低；G等位基因在CI组内的分布频率高，可能是CI的保护基因型。