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为了高效地建立翘嘴鲌育种群体,本文首先采用二次正交旋转组合设计方法探究了翘嘴鲌雌核发育的最佳诱导条件,然后利用微卫星标记分析翘嘴鲌育种群体和连续三代翘嘴鲌雌核发育(Meio-gynogenesis)群体遗传纯度变化,并通过筛选特异性亲本微卫星标记对多个家系翘嘴鲌混合育种群体进行亲子鉴定。主要研究结果如下:1、采用紫外线照射鲤鱼(Cyprinus carpio)精子使其遗传物质失活,并用冷休克方法抑制翘嘴鲌(Culter alburnus)卵第二极体的排出,诱导出翘嘴鲌雌核发育二倍体。运用3因素5水平二次正交旋转组合设计方法,分别建立冷休克起始时间(x1)、处理时间(x2)和处理温度(x3)3个因素与翘嘴鲌雌核发育率(y1)和孵化率(y2)两个指标之间的二次回归模型,探究翘嘴鲌减数分裂雌核发育的最优诱导条件组合。并采用响应面分析法(RSM),讨论各因素水平的单因素效应、互作效应对响应值的影响。结果表明,受精后6min进行冷休克,处理时间为18min,休克温度为7℃时,雌核发育率达最大(18.60%);受精后6min进行冷休克,处理时间为23min,休克温度为5℃时,孵化率达最大(33.00%)。各因素对响应值的影响均是呈开口向下的抛物面关系。根据因素贡献率得到,起始时间对冷休克影响极显著,冷休克处理温度次之,而冷休克处理时间的影响最小。本文首次采用二次正交旋转组合设计优化雌核发育诱导条件,为翘嘴鲌育种提供技术支持和理论指导。2、利用翘嘴鲌转录组数据,挑选出337对微卫星引物,筛选出109对多态性引物,并从中挑选出多态性及重复性较好的引物作为后续试验的遗传标记。以普通翘嘴鲌群体为对照组,利用20对多态性微卫星标记比较分析了翘嘴鲌减数分裂雌核发育一代(Meio-G1)、二代(Meio-G2)和三代(Meio-G3)群体的遗传结构及遗传纯合度,探讨了连续三代减数分裂雌核发育对翘嘴鲌基因纯化的效果。结果表明,20对微卫星标记在对照组、Meio-G1、Meio-G2、Meio-G3中,分别扩增到103、76、51、38个等位基因,平均观测杂合度(H0)分别为0.7724、0.4362、0.2203、0.1050;平均纯合度分别为0.2276、0.5638、0.7797、0.8950。聚类分析结果表明,Meio-G1和对照组聚为一类,Meio-G2和Meio-G3聚为一支。其中Meio-G3群体和Meio-G2群体已有位点纯合固定。表明连续多代人工诱导减数分裂雌核发育可大大加速翘嘴鲌基因位点的纯合,可为建立翘嘴鲌育种群体提供优良的育种材料。3、本文分别将3、4、5、6个翘嘴鲌雌核发育家系混合,给出亲子鉴定需要的不同的特异标记数目,可以为实际育种提供参考。随着微卫星标记数目的增加,累积排除概率逐渐增加至最大并趋于稳定的标记组合被用来作为亲子鉴定标记,减少了翘嘴鲌亲子鉴定选用标记的盲目性。筛选出的遗传标记在不同的参考群体中累积排除概率均达100%,在验证群体中子代都被成功地分配到对应的母本。这些高亲本排除率的遗传标记可作为后续新品系扩繁群体的亲本选择和DNA分子标记联合育种的候选标记。