【摘 要】
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束缚是生物医学研究应激时常用的实验模型。它主要与心理性的溃疡诱导有关。心理性应激是指排除了躯体和组织外伤,当身体不能自由活动时,引起由大脑起始的应激反应。应激时激
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束缚是生物医学研究应激时常用的实验模型。它主要与心理性的溃疡诱导有关。心理性应激是指排除了躯体和组织外伤,当身体不能自由活动时,引起由大脑起始的应激反应。应激时激活下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA),对雌性繁殖系统发挥抑制作用。在本实验中,我们以小鼠为实验动物,首先建立了一种有效的束缚应激模型,这一模型一方面不让小鼠自由掉头、转身,达到了束缚目的,另一方面让其自由采食、饮水,排除了饥渴等因素的额外影响。在实验中,我们对PMSG处理24h的小鼠进行束缚,持续处理24h后,发现:(1)应激显著下调整体卵巢、卵泡壁颗粒细胞中Bcl2/1表达水平,虽然Bax和Caspase3表达不受影响。与对照组相比,应激并没有引起新鲜COCs以及成熟培养基中培养14h COCs凋亡相关基因明显的变化,但是当COCs在缺乏血清和激素的成熟培养基中培养14h后,应激组卵丘细胞凋亡比例是对照组的2倍,Bax和Caspase3显著上调,Bcl2/1表达变化不受影响,这暗示了应激能够诱导凋亡启动;(2)应激能够显著降低血清中、卵巢上的雌二醇水平,由此引发凋亡;(3)应激之后卵巢上CRHR1 mRNA表达显著增加,这可能通过抑制睾酮分泌间接抑制雌二醇发生。卵泡壁颗粒细胞中IGF-1 mRNA表达显著下调,这从另一方面解释了雌二醇发生减少及其卵泡壁颗粒细胞中Bcl2/1 mRNA表达下调的原因;(4)应激能够显著上调卵丘中CRHR1,这可能负责后续培养过程中的凋亡显现。总之,我们采用完善的心理应激模型,证明应激通过影响CRHR1、IGF-1表达影响类固醇发生,并诱发了卵巢凋亡基因的启动,这将有助于我们进一步了解心理应激对雌性生殖系统的影响机制。
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