论文部分内容阅读
目的:(1)观察药物干预对新疆哈萨克族高血压病患者外周血T淋巴细胞体外培养增殖的抑制作用。(2)研究新疆哈萨克族高血压病患者外周血T淋巴细胞是否表达钙调磷酸酶/活化的T细胞核因子(CaN/NFAT)信号通路相关分子及其水平变化。(3)探讨ARB类降压药物替米沙坦对新疆哈萨克族高血压病患者外周血T淋巴细胞CaN/NFAT信号通路相关分子表达的影响。从而为高血压病炎症学说提供理论依据,为高血压病发病机制的探讨提供新思路,为高血压病的治疗开辟新靶点。方法:(1)收集未经降压药物治疗的新疆哈萨克族高血压病患者90例,男女各半,随机分为空白对照组、替米沙坦组、钾通道阻滞剂组(4-AP组)共三组,每组30例,男女各半。运用免疫磁珠技术分离其外周血T淋巴细胞进行体外培养并加入药物干预,采用CCK法分析检测药物处理0h、24h、48h、72h后T淋巴细胞增殖的变化。(2)随机选取未经降压药物治疗的新疆哈萨克族高血压病患者30例,男女各半,作为高血压组,同样方法随机选取相同时期30例新疆哈萨克族健康体检者,男女各半,作为正常对照组。采集两组受试者的外周静脉血,运用免疫磁珠技术筛选T淋巴细胞,分别采用RT-PCR和Western blot技术检测T淋巴细胞中NFATc1、IL-6、TNF-α的m RNA和蛋白表达及水平变化。(3)随机选取未经降压药物治疗的新疆哈萨克族高血压病患者100例,男女各半,随机分为空白对照组、替米沙坦组、CaN阻滞剂组(Cs A组)、NFAT阻滞剂组(VIVIT组)和4-AP组共五组,每组20例,男女各半。运用免疫磁珠技术分离各组患者外周血T淋巴细胞进行体外培养活化增殖,给予相应处理后继续培养72h。分别采用RT-PCR和Western blot技术检测T淋巴细胞中NFATc1、IL-6、TNF-α的m RNA和蛋白表达及水平变化。结果:(1)在不同处理条件下,T淋巴细胞的增殖情况表现各不相同。各组间T淋巴细胞的增殖差异均有统计学意义(P<0.01)。同一时间点上各组间两两比较,显示替米沙坦组和4-AP组T淋巴细胞增殖后的细胞活性较空白对照组均明显减少(均P<0.01)。同一组内不同时间点两两比较,显示各组的每一时间点T淋巴细胞增殖后的细胞活性差异均有统计学意义(均P<0.01)。随着时间延长,空白对照组细胞活性逐渐增强,替米沙坦组和4-AP组逐渐减弱(均P<0.01)。替米沙坦和4-AP可以抑制T淋巴细胞的增殖,而且在72h内的抑制作用成时间依赖性。(2)两组受试者基线资料的差异无统计学意义(P>0.05),同正常对照组相比,高血压组外周血T淋巴细胞表达CaN/NFAT信号通路关键因子NFATc1、IL-6和TNF-α,且高血压组的m RNA相对表达量均高于正常对照组,三者的蛋白表达量也较正常对照组增高(均P<0.05)。(3)五组受试者基线资料的差异无统计学意义(P>0.05),NFATc1、IL-6、TNF-α的m RNA和蛋白在各组中均有表达,替米沙坦组、Cs A组、VIVIT组和4-AP组T淋巴细胞活化增殖后NFATc1、IL-6、TNF-α的m RNA和蛋白表达较空白对照组均明显降低(均P<0.05),Cs A组、VIVIT组和4-AP组T淋巴细胞NFATc1、IL-6、TNF-α的m RNA和蛋白表达均低于替米沙坦组(均P<0.05),Cs A组、VIVIT组和4-AP组T淋巴细胞NFATc1、IL-6、TNF-α的m RNA和蛋白表达无显著差异(P>0.05)。结论:(1)替米沙坦对新疆哈萨克族高血压病患者外周血T淋巴细胞的活化增殖有明显的抑制作用,并且其作用在一定的干预时间内呈时间依赖性。说明替米沙坦可以通过抑制T淋巴细胞的增殖发挥调节高血压炎症的作用。(2)新疆哈萨克族高血压病患者外周血T淋巴细胞上表达CaN/NFAT信号通路的相关分子,并且该通路的相关分子在外周血T淋巴细胞上表达明显增多,初步说明CaN/NFAT信号通路可能与高血压病存在一定的相关性。(3)替米沙坦能有效抑制高血压病患者外周血T淋巴细胞CaN/NFAT信号通路相关分子的表达,提示替米沙坦具有抗高血压炎症的作用。