【摘 要】
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帕金森病(PD)是一种以中脑黑质多巴胺神经元变性、缺失，以静止性震颤、运动迟缓、肌强直、姿势步态异常为主要特征的神经系统变性疾病。目前认为可能由多种基因突变、环境毒素
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帕金森病(PD)是一种以中脑黑质多巴胺神经元变性、缺失，以静止性震颤、运动迟缓、肌强直、姿势步态异常为主要特征的神经系统变性疾病。目前认为可能由多种基因突变、环境毒素、年龄老化共同作用的结果。但引起PD的确切病因和发病机理迄今仍不清楚。随着蛋白质组学的发展，有关神经系统的脑脊液蛋白质组学也渐渐展开，但帕金森病脑脊液研究较少，而且脑脊液为高盐低蛋白体液，其中高丰度蛋白(白蛋白，IgG等)占据绝大部分，使具有重要生理作用的低丰度蛋白检出下降，分辨率低。如何改善脑脊液样品处理，提高分辨率和重复性，建立稳定的脑脊液双向凝胶电泳技术是尚待解决的问题。
目的：探索去除脑脊液高丰度蛋白的方法，建立双向凝胶电泳(2-DE)适宜的实验方案；比较PD患者和对照组脑脊液2-DE图谱，寻找有意义的差异蛋白。为脑脊液蛋白质组学提供技术平台，并为探索帕金森病发病机制提供新的思路。
方法：
1．建立稳定的脑脊液双向凝胶电泳体系
①用Oasis HLB柱层析分馏将脑脊液中高丰度蛋白去除，过滤液冻干，丙酮沉淀去盐浓缩，提取脑脊液中低丰度蛋白。②以固相pH梯度等电聚焦(IPG-IEF)为第一向，垂直平板十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)为第二向进行2-DE；③用银染法对电泳后的凝胶染色，采集凝胶图像并进行图像分析。
2．根据已建立的实验方法进行帕金森患者脑脊液蛋白质组学研究，寻找差异点，并行质谱鉴定。
结论：
1、运用Oasis HLB过滤柱层析分馏可以有效地去除脑脊液中高丰度蛋白质，使低丰度蛋白检出率增加，建立了稳定的脑脊液双向凝胶电泳体系；
2、PD患者与对照组脑脊液蛋白质表达有明显差异，部分蛋白质在PD患者脑脊液中上调或下调，这些差异蛋白质可能与帕金森病发病机制有关。
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