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目的:
探讨在百草枯(paraquat,PQ)所致急性肺损伤(acute lung injury,ALI)过程中热休克蛋白70(heat shock protein,HSP70)和NF-κB p65 mRNA在肺组织中的表达及乌司他丁(uliInastatin,UTI)干预作用。
方法:
随机将健康成年SD大鼠72只分三组:空白对照组(A组),单纯PQ染毒组(B组)和UTI治疗组(C组),每组各24只。B组和C组用PQ一次性灌胃(80 mg/kg)染毒建立SD大鼠中毒模型；A组等量生理盐水灌胃；C组于PQ灌胃后30 min腹腔内注射UTI(100000U/kg),以后每12小时一次；A组和B组等量生理盐水腹腔内注射。各组于染毒后12、24、48、72 h处死大鼠留取标本。分别检测各时间点支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数、中性粒细胞百分比和蛋白含量及肺湿/干重比(W/D)；观察各时间点肺组织大体改变和HE染色光镜下改变；采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定不同时间点肺组织中HSP70和NF-κB p65 mRNA的表达情况。
结果:
(1)肺组织W/D比较:与A组比较,B组各对应时间点肺W/D明显增高(p皆<0.01)；C组虽较A组增高(p皆<0.05),但较B组降低(p皆<0.05)。
(2)BALF中蛋白含量变化:B、C组与A组相应时间点比较明显增高(P皆<0.01)；C组较B组各时间点明显降低(P皆<0.01)。
(3)BALF中WBC计数:与A组比较,B、C组各对应时间点BALF中WBC总数明显增高(P皆<0.01)；C组各对应时间点WBC总数较B组明显降低(P皆<0.01)。
(4)BALF中PMN百分比变化:与对应时间点比较,B组BALF中PMN百分比较A组明显增高(P皆<0.01)；C组虽较A组增高(12、24h,P<0.05；48、72h,P<0.01),但较B组各对应时间点降低(P皆<0.05)。
(5)肺组织HSP70 mRNA表达情况:与A组相比,B组肺组织HSP70mRNA的表达在染毒后12 h明显增强(P<0.01),24 h达高峰。与B组相比,C组肺组织HSP70mRNA各个对应时点的表达均明显增强(P皆<0.01),峰值仍在24h。
(6)肺组织NF-κB p65 mRNA表达情况:PQ中毒后,B组肺组织NF-κBp65mRNA表达明显高于A组(P皆<0.01)；C组虽然高于A组(12h,P<0.05；24、48、72h,P<0.01),但明显低于B组(P皆<0.01)。
(7)肺组织病理学变化:大体观察A组肺脏呈粉红色,无充血、水肿及梗死灶。B组肺呈暗红色,肺体积增大,明显充血、水肿,可见广泛的点或灶状出血,切口可见粉红色泡沫样液体溢出。C组充血、水肿较PQ组轻,于肺脏边缘可见少许梗死灶。光镜检查:B组可见肺灶性出血,肺泡壁明显增厚,肺泡和肺间质水肿,大量炎性细胞浸润,部分切片可见灶状肺不张,肺气肿。C组出血、水肿、炎细胞浸润的改变程度较PQ组明显减轻。
结论:
(1)PQ可使大鼠肺组织NF-κB p65 mRNA表达增加,并与肺组织炎症反应程度相关。
(2)UTI可明显缓解大鼠肺脏的炎症反应,在提高大鼠肺组织HSP70 mRNA表达的同时明显降低NF-κB p65 mRNA的表达。对PQ中毒肺脏有保护作用。