翼状胬肉组织中异常脂类代谢的研究

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翼状胬肉作为一种常见的眼科疾病,其发病机理尚未明确,目前缺乏有效的药物治疗方法,手术切除是唯一有效的治疗方式。深入研究翼状胬肉的病理改变将有助于揭示翼状胬肉的病理生理过程,为发展新的治疗方法奠定基础。近年来,有研究发现翼状胬肉组织中存在异常脂类代谢,但是异常脂类代谢在翼状胬肉发生发展中的作用仍不清楚。  目的:  检测翼状胬肉组织中的异常脂类代谢,探究脂类代谢异常在翼状胬肉发生发展过程中的作用。  方法:  本实验收集35例翼状胬肉患者的病理组织和5例患者的正常结膜组织,用于冰冻包埋、石蜡包埋和RNA提取。通过苏丹黑-B、油红O染色检测翼状胬肉头部是否存在脂类沉积;通过特定脂类提取实验、FilipinⅢ染色实验检测翼状胬肉头部所含主要脂类成分;用免疫组织化学和免疫荧光技术检测了APOA1、B、E,CD68和CD45,氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL),两种氧化型低密度脂蛋白受体:凝集素样低密度脂蛋白受体1(LOX-1)和磷脂酰丝氨酸和氧化脂蛋白清道夫受体(SR-PSOX/CXCL16),低密度脂蛋白受体(LDL-R)在翼状胬肉中的表达;分别提取翼状胬肉上皮和基质的RNA,用实时荧光定量PCR方法检测凝集素样低密度脂蛋白受体1(LOX-1),磷脂酰丝氨酸和氧化脂蛋白清道夫受体(SR-PSOX/CXCL16)以及低密度脂蛋白受体(LDL-R)的表达。  结果:  苏丹黑-B和油红O染色结果显示,在翼状胬肉头部存在明显着染区,特定脂类提取实验、FilipinⅢ染色实验显示,脂类沉积区含有胆固醇酯和游离胆固醇。载脂蛋白A1(APOA1)仅仅在进展期翼状胬肉中有表达,在静止期翼状胬肉和正常结膜中没有表达;载脂蛋白E(APO E)在所有翼状胬肉组织中均有表达,在正常结膜中仅有微弱表达;载脂蛋白B(APO B)在正常结膜和翼状胬肉中均未见表达,而其氧化产物:氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)及其受体凝集素样低密度脂蛋白受体1(LOX-1)、磷脂酰丝氨酸和氧化脂蛋白清道夫受体(SR-PSOX/CXCL16)在正常结膜和翼状胬肉中被检测到。氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)在翼状胬肉中表达强于正常结膜;凝集素样低密度脂蛋白受体1(LOX-1)在翼状胬肉上皮中表达比正常结膜上皮弱,然而在翼状胬肉基质中的表达强于正常结膜基质;磷脂酰丝氨酸和氧化脂蛋白清道夫受体(SR-PSOX/CXCL16)表达无明显差异;翼状胬肉组织中CD68和CD45阳性区域与氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)分布有一致性。低密度脂蛋白受体(LDL-R)在翼状胬肉上皮表达强于结膜上皮。  结论:  翼状胬肉头端存在脂类沉积,这些沉积的脂类中含有胆固醇酯和游离胆固醇,它们可能来自于同样沉积于此处的某些载脂蛋白;氧化型低密度脂蛋白可能参与了翼状胬肉病理过程;翼状胬肉上皮中低密度脂蛋白受体(LDL-R)的表达高于正常结膜上皮。
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