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马铃薯甲虫Leptinotarsa decemlineata (Say)是北美洲、欧洲和亚洲的大部分国家马铃薯上最重要的食叶害虫。马铃薯甲虫于上世纪90年代从哈萨克斯坦入侵中国,现分布于新疆维吾尔自治区北疆的大部分县(市)。马铃薯甲虫在新疆北疆严重为害马铃薯和茄子。化学防治是一种经济、高效的治理措施。但马铃薯甲虫极易对任何种类的化学药剂产生抗药性。因此,监测其抗药性、分析其抗性机制十分重要和迫切。本文监测了我国主要发生区马铃薯甲虫对5种有机磷(谷硫磷、辛硫磷、马拉硫磷、二嗪磷、水胺硫磷)和3种氨基甲酸酯(克百威、丁硫克百威、甲萘威)杀虫剂的抗药性,并研究了相关的抗性机制。1.马铃薯甲虫相对敏感品系的筛选采集了新疆维吾尔自治区特克斯县的田间品系的成虫和幼虫,测定了田间品系的成虫和4龄幼虫对有机磷和氨基甲酸酯杀虫剂的b值和LD50值。测定结果与国外报道敏感品系对应数据相比较,b值接近或更小,LD50接近,因此可以把特克斯县的品系作为相对敏感品系。2.诊断剂量法监测马铃薯甲虫对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂抗性水平采用诊断剂量法监测了北疆10个县(市)马铃薯甲虫对8种杀虫剂的抗性水平。发现部分县(市)田间种群都对水胺硫磷、马拉硫磷、克百威和丁硫克百威产生了不同程度的抗药性。其它有机磷杀虫剂和甲萘威在所测县(市)中依然比较敏感。3.毒力回归线法监测马铃薯甲虫对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂抗性水平应用毒力回归线法监测了新疆的察布查尔县、昌吉县、尼勒克县和特克斯县4个不同地理种群的马铃薯甲虫。发现察布查尔田间种群成虫对克百威的抗性较高,达到了18.7倍的抗性,为中等抗性水平。尼勒克田间种群对丁硫克百威抗性为90倍,达高水平抗性;对昌吉田间种群抗性为24.7倍,达中等水平抗性。昌吉和尼勒克田间种群对克百威的抗性分别为17.8倍和10.1倍,均达到中等水平抗性。昌吉田间种群4龄幼虫的对谷硫磷的低水平抗性(7.0倍)。4.增效剂对农药的增效作用测定了增效醚(PBO)、顺丁烯二酸二乙酯(DEM)和磷酸三苯酯(TPP)对马铃薯甲虫成虫和4龄幼虫的增效作用。DEM和TPP在察布查尔田间种群对克百威具有明显的增效作用。PBO、DEM和TPP在昌吉和尼勒克田间种群对克百威均具有明显的增效作用。与此相反,在测定田间种群中,这3种增效剂对谷硫磷无明显增效作用。可见,多功能氧化酶、酯酶和谷胱甘肽-S-转移酶的解毒作用增强与抗性有关。5.马铃薯甲虫乙酰胆碱酯酶基因抗性相关突变位点的证实马铃薯甲虫乙酰胆碱酯酶基因与有机磷和氨基甲酸酯农药抗性相关的突变位点有三个,分别是S291G、R30K和1392T。本章克隆了新疆马铃薯甲虫含有乙酰胆碱酯酶基因包含S291G的片段,证实了这一突变位点的存在。6. Bi-PASA检测马铃薯甲虫乙酰胆碱酯酶S291G突变频率利用Bi-PASA技术检测新疆昌吉县马铃薯甲虫成虫乙酰胆碱酯酶的突变频率。180头马铃薯甲虫用克百威0.0835μg/头预处理后,死亡91头,死亡率为50.5%。Bi-PASA检测了存活成虫27头,抗性纯合子9头,抗性杂合子18头。昌吉田间种群马铃薯甲虫成虫乙酰胆碱酯酶S291G频率为32.9%,纯合子个体频率16.3%。