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目的:微观探索研究肾细胞癌的免疫周围微环境,分析T淋巴细胞的分类、亚群及功能;明确肾细胞癌的多种临床病理特点与CD4+T细胞、调节性T细胞及转化生长因子-β1的相关关系,并分析三者与肾癌预后的对应关系;探索研究肾癌中Treg、TGF-β1的表达升高的机制。方法:收集整理2006年1月~2015年10月期间于天津医科大学第二医院泌尿外科住院行部分肾切除术或根治性肾切除术的肾细胞癌患者相关临床资料,并随机的从中选择术后资料完整保存的341例患者作为研究对象,提取患者完整石蜡块标本及-80℃条件下冷冻保存的组织块,运用免疫组织化学染色的相关方法,研究肿瘤组织中CD4+、FOXP3、转化生长因子-β1三者的各自蛋白表达情况,探索肾癌的临床病理特点与三者的相关关系,并分析三者干预预后的特点;运用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测肾癌细胞与CD4+T细胞进行共培养后TGF-β1的表达。运用蛋白免疫印迹(Western blotting)方法对肾脏肿瘤组织及对照组织中CD4+,Foxp3、TGF-β1三者蛋白表达水平进行检测,探索三者之间的相关性。结果:(1)不同分期、分级的肾癌组织中免疫淋巴细胞浸润的程度差异很大,肾细胞癌组织的淋巴细胞的浸润方式分为分散形式和聚集形式两种,肾细胞癌肿瘤组织中淋巴细胞的浸润程度明显多于对照组的浸润程度。(2)单因素生存分析显示被研究者的性别、年龄跟肾癌的预后无明显相关性(P=0.102,P=0.427);肿瘤位于肾脏的部位、肿瘤侧别跟肾癌预后无相关性(P=0.671,P=0.113),CD4+T细胞的增多与肾癌的总生存率及疾病的无进展生存率无明显相关性(P=0.509,P=0.516);肾细胞癌肿瘤组织中FOXP3及TGF-β1的表达增高与患者的总生存率和术后无进展生存率均呈明显的负相关(P<0.001,P<0.001;P<0.001,P<0.001)。另外,在肾癌患者的预后方面,肿瘤的TNM分期、肿瘤直径的大小及fuhrma核分级情况三者均与肾细胞癌的预后显著相关。(3)多因素生存分析显示肾癌组织中FOXP3、TGF-β1表达的增多与肾癌的不良预后呈显著性相关,同时肾癌的TNM分期、fuhrman核分级及直径的增加均可引起肾癌患者的生存率下降;分析显示肿瘤中Treg细胞数量的增多及TGF-β1表达水平升高均与肾癌的TNM分期、fuhrman核分级及直径差别呈显著正相关。(4)运用Western blot方法对肾癌组织与正常对照组织中CD4+、Foxp3、TGF-β1的蛋白表达水平进行相关检测,结果比较显示肾肿瘤组织中Foxp3、TGF-β1蛋白含量均明显高于对照组相应含量,差异有统计学意义(P<0.05)。CD4+的水平虽然在肾肿瘤组织及正常对照组比较中无显著差异(P>0.05)。结论:肾肿瘤中调节性T细胞数量增多、TGF-β1的升高,肿瘤TNM分期增加、fuhrman核分级增加和直径增加均可作为一个独立指标提示肾癌预后不良。肾肿瘤中FOXP3与TGF-β1蛋白水平呈正相关。CD4+虽然总体数量与肾癌无显著关系,但是其可以促进肾癌表达TGF-β1因子增加;同时在TGF-β1因子诱导下,其总体亚群平衡被破坏,Th亚群发生向Treg的诱导分化,肾癌又通过Treg的作用发生免疫逃逸。TGF-β1因子本身同样可以诱导恶性肿瘤内血管形成及发生上皮间质转化促进肿瘤发生浸润及转移,调节性T细胞的数目增加及TGF-β1因子的高表达可能是导致肾癌预后较差的主要原因之一。