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背景5~10-亚甲基四氢叶酸还原酶（5~10-methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR）是叶酸代谢途径的关键酶,通过参与叶酸及同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）代谢在体内反应中起着重要作用。MTHFR编码基因677位点突变可导致酶活性下降,MTHFR C677T有CC型、CT型及TT型三种基因型,对应的酶活性为100%、65%、30%,酶活性的降低可引起体内Hcy积聚和低叶酸水平。MTHFR C677T多态性及其带来的Hcy升高和叶酸的降低与心血管疾病、神经及精神疾病、糖尿病、癌症等发生风险增加相关,并影响着卵母细胞成熟及胚胎质量、精子质量,与复发性流产、妊娠并发症及出生缺陷有关。叶酸在卵母细胞质量、卵母细胞成熟、胚胎着床、正常妊娠及预防出生缺陷中起着重要作用。母亲叶酸缺乏,胎儿出生缺陷、胎儿畸形、胎儿生长受限、早产及某些胎盘疾病的发生风险增加。女性在备孕及孕早期补充叶酸可大大降低神经管缺陷、先天性心脏病及唇腭裂的发生。较高的叶酸补充量有着更好的胚胎植入率、临床妊娠率、活产率,且叶酸水平与受精率之间呈正相关。但母体内叶酸过量可能引起妊娠期糖尿病发病率增高,后代易患胰岛素抵抗、肥胖,脐血中DNA甲基化水平降低。国内外均建议备孕女性适当每日补充叶酸至少0.4mg用于预防出生缺陷,对于具有MTHFR基因多态性的女性,建议根据个体化酌情增加叶酸补充剂量或延长叶酸补充时间。目前MTHFR C677T TT型不孕妇女不同叶酸补充剂量或补充方案对于其行辅助生殖助孕结局的影响还没有得到很好的研究。因此,本研究首先通过检测广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科就诊不孕人群的MTHFR C677T基因型及血清Hcy、血清叶酸及红细胞叶酸水平,分析基因多态性、叶酸的评估指标与体外受精（in-vitro fertilizationIVF）/卵胞浆内单精子显微注射（intracytoplasmic sperm injectionICSI）结局的关系,然后探索不同叶酸补充方案对MTHFR C677T TT型不孕妇女IVF/ICSI结局的影响。研究内容第一部分MTHFR C677T基因型与血清Hcy及IVF/ICSI结局关系的探索目的探讨患者MTHFR C677T基因型与其血清Hcy水平、IVF/ICSI结局的关系。资料与方法回顾性分析2019年1月至2022年12月于广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科行IVF/ICSI助孕共2376名患者的资料,以MTHFR C677T基因型分为CC型（1145位）、CT型（985位）及TT型（246位）三组。通过Bonferroni/Kruskal-Wallis检验及事后比较、卡方检验分析MTHFR C677T基因型与血清Hcy以及其IVF/ICSI结局的关系。结果1.TT型患者血清Hcy（10.41±5.45 umol/L）显著高于CC型（8.42±1.92 umol/L）及CT型（8.56±2.18 umol/L）（P＜0.05）,CC型与CT型患者血清Hcy无统计学差异（P＞0.05）。2.TT型患者优质囊胚数显著低于CC型、CT型患者（P＜0.05）,CC型患者与CT型比较所获优质囊胚数无统计学意义（P＞0.05）;三组基因型患者所获囊胚形成率及优质囊胚率呈CC型＞CT型＞TT型（P＜0.05）。结论1.MTHFR C677T TT基因型患者血清Hcy显著高于CC型与CT型。2.MTHFR C677T TT基因型不孕患者行IVF/ICSI治疗,所获优质囊胚数显著低于CC型、CT型患者。3.MTHFR C677T三个基因型患者行IVF/ICSI治疗,所获囊胚形成率及优质囊胚率呈CC型＞CT型＞TT型。第二部分叶酸评估指标与IVF/ICSI结局关系的探索目的探索不孕妇女红细胞叶酸、血清叶酸及Hcy水平与其首次IVF/ICSI结局的关系,了解其对IVF/ICSI结局的预测价值。资料与方法回顾性分析2022年3月至2022年12月于广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科行IVF/ICSI助孕,且在距离取卵时间3个月内检验了红细胞叶酸、血清叶酸及血清Hcy水平的205名不孕妇女的资料。将红细胞叶酸水平根据四分位数间距分为Q1（103.5~256.8 ng/ml）、Q2（257.7~332.7 ng/ml）、Q3（334.4~434.6 ng/ml）及Q4（442.3~1192.4 ng/ml）四组,应用Bonferroni/Kruskal-Wallis检验及事后比较、卡方检验及相关性分析比较不孕妇女红细胞叶酸水平与其首次IVF/ICSI结局的关系。结果1.红细胞叶酸水平与血清叶酸水平呈正相关（ρ=0.726,P＜0.05）;红细胞叶酸水平与血清Hcy水平呈负相关（ρ=0.191,P＜0.05）;血清叶酸水平与血清Hcy水平呈负相关（ρ=0.177,P＜0.05）。2.Q1组患者行IVF、ICSI所获2PN受精率（IVF 55.2%,ICSI 70.3%）均显著低于Q2（IVF 68.10%,ICSI 82.7%）、Q3组（IVF 66.7%,ICSI 87.7%）及Q4组（IVF 67.1%,ICSI 84.1%）患者所获的2PN受精率（P＜0.05）。结论:1.红细胞叶酸水平与血清叶酸水平呈正相关;血清Hcy水平与红细胞叶酸、血清叶酸水平呈负相关。2.红细胞叶酸水平＜256.8 ng/ml的不孕妇女2PN受精率显著下降。第三部分不同叶酸补充方案对MTHFR C677T TT基因型不孕妇女IVF/ICSI结局影响的研究目的探讨MTHFR C677T TT型不孕妇女补充合成叶酸0.4mg/天、0.8mg/天及补充活性叶酸400μg/天三组之间的IVF/ICSI结局。资料与方法回顾性分析2019年1月至2022年12月于广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科就诊的MTHFR C677T TT型共217名不孕妇女的叶酸补充情况及首次IVF/ICSI结局。将217名患者分为A组（补充合成叶酸0.4mg/天）、B组（补充合成叶酸0.8mg/天）及C组（补充活性叶酸400μg/天）,三组患者取卵前叶酸补充至少1个月。通过Kruskal-Wallis检验及事后比较、方差分析及卡方检验比较三组IVF/ICSI助孕胚胎质量及妊娠结局。结果1.A、B、C三组叶酸补充时间,2PN受精率有统计学差异（P＜0.05）。三组间叶酸补充时间:A组＞B组＞C组（P＜0.05）;A组与B、C组相比2PN受精率显著降低（P＜0.05）,B、C两组间2PN受精率无统计学差异（P＞0.05）。2.A、B、C三组患者累计临床妊娠率无统计学差异,B、C组相比A组累计临床妊娠率呈上升趋势（P＞0.05）,三组间生化妊娠率无统计学差异（P＞0.05）。结论1.在叶酸补充时间为A组＞B组＞C组情况下,补充合成叶酸0.4mg所获2PN受精率较补充合成叶酸0.8mg及活性叶酸400μg的女性显著降低。2.在叶酸补充时间为A组＞B组＞C组情况下,补充合成叶酸0.8mg及活性叶酸400μg较补充合成叶酸0.4mg所获累计临床妊娠率呈上升趋势。