H9N2亚型禽流感病毒致小鼠肺损伤的研究

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H9N2亚型禽流感病毒于1996年首次分离得到以来,其已经在世界范围内广泛分布,并且在家禽中建立了稳定的种系。近年来研究表明,由于H9N2持续在家禽中流行并变异,增加了与其他亚型流感病毒重组的机会,扩大了宿主范围,使其具备了感染哺乳动物的能力。为了研究H9N2对哺乳动物的致病性,采用分离自我国河北省某养殖场的A/Chicken/Hebei/4/2008(H9N2)毒株进行了其对Balb/c小鼠致病性及肺损伤的初步研究。  1.将 EID50=10-6.25/0.2ml的A/Chicken/Hebei/4/2008(H9N2)毒株用生理盐水稀释10倍,试验组Balb/c小鼠每只滴鼻100ul,对照组采用同样方式滴鼻100ul SPF鸡胚尿囊液,于攻毒后第1、3、5、7、11、15天试验组和对照组分别剖杀6只小鼠。研究结果显示,在未经预先适应的条件下,大部分小鼠在第3天攻毒组出现精神沉郁、呼吸困难、体重下降;病毒在肺部复制的高峰期出现在第5天;剖检病理变化表现为肺部出血、淤血,且有水肿现象;组织切片可观察到肺间质增厚、大量炎性细胞浸润。而对照组无明显变化。  2.通过ELISA试剂盒检测HYP、OFR、MDA、SP-A和SP-D含量,研究结果显示,肺组织纤维化指标 HYP与对照组差异极显著,自攻毒后第一天出现逐渐上升趋势;肺组织氧化损伤指标OFR和MDA与对照组没有显著变化;肺表面活性蛋白SP-A在攻毒后的第一天和第三天与对照组差异显著,SP-D含量在攻毒后的第五天、第七天和第十一天与对照组差异极显著。  3.采用亲和组化法标记唾液酸α-2,3-Gal受体和α-2,6-Gal受体,研究结果显示,Balb/c小鼠在攻毒后支气管上皮唾液酸α-2,3-Gal受体和α-2,6-Gal受体表达量明显低于未攻毒的Balb/c小鼠,表明攻毒后机体会降低受体的表达量,起到自我保护作用。
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