【摘 要】
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Ag85A DNA疫苗对膀胱癌荷瘤鼠淋巴细胞增殖能力和FasL mRNA表达的影响 前言 膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一,在男性常见肿瘤中居第四位,女性常见肿瘤中居第十位。膀胱
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Ag85A DNA疫苗对膀胱癌荷瘤鼠淋巴细胞增殖能力和FasL mRNA表达的影响 前言 膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一,在男性常见肿瘤中居第四位,女性常见肿瘤中居第十位。膀胱癌90%以上为移行上皮细胞癌,有相当一部分为浅表性膀胱癌。用卡介苗(BCG)进行膀胱腔内灌注来预防膀胱癌复发或治疗原位癌是至今最成功的免疫疗法之一。但相当数量的患者对BCG治疗无效或在治疗中产生副作用。因此有必要寻找一种更有效、更安全的制剂替代此种疗法。 Ag85复合物主要由分子量为30-32kDa的Ag85A、Ag85B、Ag85C三种蛋白质组成,是结核分枝杆菌分泌蛋白和BCG培养滤液的主要成分。其中Ag85A可能是细菌生长和维持毒力的最重要成分。用编码Ag85A的DNA疫苗免疫小鼠,可诱导小鼠产生强烈的Th1型免疫应答和CD8 T细胞介导的细胞毒性免疫应答,并能抵御经气溶胶或静脉内结核杆菌攻击,提示编码Ag85A的DNA免疫可诱生较结核杆菌感染更强烈、更广泛的T细胞应答。 本实验通过给C3H/HeN小鼠皮内接种MBT-2细胞建立移植性膀胱癌模型,再经肌肉注射Ag85A DNA疫苗,探讨该疫苗对荷瘤鼠T细胞免疫应答,尤其是对细胞毒性T细胞杀伤活性的影响,为Ag85A DNA疫苗可否用于膀胱癌的治疗提供实验依据。 实验材料和方法 用碱裂解法从转化后的JM109大肠杆菌中提取Ag85A-V1Jns.tpA质粒和V1Jns.tpA质粒,用BglⅡ限制性内切酶酶切质粒,经琼脂糖凝胶电泳鉴定结果。用碱裂解法大量提取质粒后用聚乙二醇法纯化质粒,调整浓度
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