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卤虫(Artemia)又称盐水丰年虫、丰年虾、卤虾等,在分类学上隶属于节肢动物门(Phylum Arthropoda),甲壳纲(Crustasea),鳃足亚纲(Branchiopoda),无背甲目(Anostacea),卤虫科(Artemidae)中的卤虫属(Artemia)。是一种世界性分布的,广温、耐高盐的小型甲壳动物。Sp(a)tzle基因编码一个神经生长因子样蛋白(NGF-likeprotein),提示Sp(a)tzle基因与胚胎的生长发育相关,在胚胎背腹轴分化过程中,Easter基因编码的蛋白酶激活Sp(a)tzle使其与卵母细胞腹侧的Toll结合,充分激活腹侧发育途径。此外,Toll途径在无脊椎动物抗真菌及抗革兰氏阳性菌应答诱导抗菌肽表达过程中是必需的,而这一过程中Toll不能直接被外源病原微生物激活,Sp(a)tzle仍作为一个重要的膜外配体存在,当受到感染后肽聚糖识别受体协同作用将信号通过SPE的酶切水解传递到Sp(a)tzle,进而启动Toll途径。本文根据GenBank上A.franciscana基因序列设计引物,以中国卤虫总RNA为模板,经过PCR扩增得到了长297bp的基因片断,用NCBI数据库进行Blastn比对及开放阅读框分析,并用ClustalX1.83软件对该序列及其假定表达氨基酸序列分别和相近物种的基因序列及氨基酸序列进行比对分析,确认该序列是中国卤虫Sp(a)tzle基因的部分序列,并根据这部分序列设计Real-time PCR引物。本实验用整体免疫组化的方法首次确定了Sp(a)tzle基因在中国卤虫不同发育时期的表达部位。并首次通过RT-PCR技术检测Sp(a)tzle基因在中国卤虫胚胎发育各阶段及在不同浓度革兰氏阳性菌刺激下表达量的变化。实验结果显示Sp(a)tzle基因在卤虫胚胎发育的各个时期持续表达,表达部位主要集中于头、胸、腹部,在发育后期在消化道内壁及鳃叶上也有表达,表达量随着中国卤虫的不断发育呈现一个先降后升的趋势。在受到革兰氏阳性菌刺激后,Sp(a)tzle表达量随着菌浓度的增加也不断增加。推测Sp(a)tzle基因在卤虫胚胎发育的早期与体轴发育背腹轴的形成相关,随着发育的进行及生活环境的变化Sp(a)tzle在卤虫天然免疫应答途径中起重要作用。