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目的:将鼠白介素-12(mIL-12)基因通过质粒载体pSEC导入乳酸乳球菌(NZ9000)中，观察mIL-12在乳酸乳球菌中的分泌表达：通过鼻腔免疫的方法来观察mIL-12对小鼠哮喘模型气道炎症及其辅助T细胞亚群的影响。
方法:将鼠IL-12基因连接到pSEC载体上，然后将其转化到NZ9000中，用乳链菌肽(Nisin)诱导表达mIL-12蛋白质，Western-blot鉴定mIL-12。将菌液离心浓缩后通过滴鼻途径作用于小鼠。BALB/c小鼠50只，随机分为5组，即模型对照组(A组)；PBS滴鼻组(B组)；野生菌滴鼻组(C组)；重组mIL-12(rmIL-12)滴鼻组(D组)；工程菌滴鼻组(E组)。除A组外，其他各组每只小鼠在l，7，14天腹腔注射卵白蛋白OVA(100μg/0.5m1)，在第20至26天雾化吸入2％OVA每天一次。B、C、E组在1，2，3，14，19，20，21天分别鼻腔给予PBS液，不含质粒载体的野生乳酸菌(约5×10<8>CFU)，含IL-12的质粒载体的工程菌(约5×10<8>CFU各10μ1。D组20，21，22天给予商业化购买的重组白介素12，第28天杀小鼠测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中的嗜酸粒细胞(EOS)个数及白介素4(IL-4)、干扰素(IFN-Y)水平。肺组织HE染色切片观察病理变化情况。
结果:mIL-12能够在乳酸乳球菌NZ9000中表达并释放到细胞外，约80pg/ml。A-E组BALF中EOS的数量分别为O.51±O.23×10<4>cell/ml；21.32±5.7l×10<4>cell/ml；22.84±6.16×10<4>cell/ml；2.15±O.63×10<4>cell/m1；2.62±0.73×10<’4>cell／ml。IL-4的含量分别为：68.43±9.08 pg／ml；332.13±61.36 Pg／ml；324.65±57.27 pg／ml：121.25±35.55 pg／ml；114.22±15.70 pg／ml。IFN-γ的含量分别为110.28±12.19 pg／ml；56.25±12.08 pg／ml；70.36±8.27 pg／ml；166.11±57.12 pg／ml；171.75±60.90 pg／ml。实验动物组B和C组的EOS数、IL-4与IFN-Y含量与A组相比有统计学差异(P<0.01)；D，E组与B，C组比较有统计学差异(P<0.01)。工程菌组的小鼠肺组织炎症细胞浸润明显减少，气道上皮损害减轻。
结论:通过pSEC载体导入乳酸乳球菌能有效获得rmIL-12；鼻腔应用mIL-12能够较好地调节Thl／Th2平衡，使IL-4下调和IFN-γ表达上调，从而对小鼠哮喘模型的气道炎症有较为理想的保护作用。