论文部分内容阅读
目的：
观察百草枯急性中毒大鼠肺组织中与调亡相关的因子（Cytc和caspase-3的基因表达及二巯丙黄钠（Na-DMPS）干预的影响，探讨百草枯对大鼠肺损伤的机制和Na-DMPS的保护作用。
方法：
清洁级雄性SD大鼠100只，随机分成4组：（1）正常对照组（NC组）：10只，给予相应体积的生理盐水腹腔注射；（2）Na-DMPS对照组：10只，以200mg/kgNa-DMPS腹腔注射；（3）PQ染毒组（PQ组）：40只，予1％的PQ剂量20mg/kg一次性左腹腔注射染毒；（4）二巯丙磺钠保护组（PQ+Na-DMPS组），40只，右腹腔注射200mg/kg Na-DMPS后15min，予1％的PQ，20mg/kg一次性左腹腔注射染毒，建立大鼠PQ急性中毒Na-DMPS保护模型。正常对照组及Na-DMPS对照组于处理后1天，PQ组及Na-DMPS组于染毒后6h，1d，3d，7d各取10只，以10％的水合氯醛麻醉大鼠，去其肺组织冷生理盐水冲洗后．70℃冻存。
采用Trizol试剂提取各组大鼠肺组织总RNA，紫外分光光度计测定RNA浓度，以总RNA为模板，逆转录成cDNA。然后以cDNA为模板，以大鼠Cytc、caspase-3引物进行PCR扩增反应。扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，电泳结果用凝胶成像系统成像，用凝胶图像分析系统（Gel-Pro Analyzer Version3．0）分析结果，以（目的基因/β-actin）为该基因表达的相对值。
计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，应用SPSS12．0进行t检验、方差分析等处理，P<0．05为差异有显著性意义。
结果：
1．NC组及Na-DMPS组大鼠肺组织Cytc mRNA表达量较低，两组相比无统计学差异。同正常对照组相比，PQ组中毒后6h、1d、3d、7d的CytcmRNA表达量均明显升高（P<0．05），中毒后3d为最高。同Na-DMPS组相比，PQ组中毒后6h、1d、3d的CytcmRNA表达量均明显升高（P<0．05）。PQ+Na-DMPS组中毒后1d、3d肺组织CytcmRNA表达量均明显高于正常对照组及Na-DMPS组（P<0．05），6h、7d CvtcmRNA表达量与正常对照组及Na-DMPS组比均无明显差异（P>0．05）。与相同时间点的PQ组相比，PQ+Na-DMPS组6h、1d、3d的CytcmRNA表达量均明显降低（P<0．05）。
2．NC组及Na-DMPS组大鼠肺组织caspase-3mRNA表达量很低，两组相比无统计学差异。与NC组及Na-DMPS组相比，PQ组中毒后6h、1d、3d、7d的caspase-3mRNA表达量均明显升高（P<0．05），中毒后3d为最高。PQ+Na-DMPS组中毒后1d、3d肺组织caspase-3mRNA表达量均明显高于NC组及Na-DMPS组（P<0．05），6h、7dcaspase-3mRNA表达量与NC组及Na-DMPS组相比均无明显差异（P>0．05）。与相同时间点的PQ组相比，中毒6h、1d、3d时PQ+Na-DMPS组caspase-3 mRN表达量均明显降低（P<0．05）。
结论：
1．百草枯急性中毒大鼠肺组织CytcmRNA表达量在中毒后6h即明显升高，3d达高峰，到7d明显下降；肺组织caspase-3mRNA表达量中毒后6h明显升高，3d达高峰，到7d明显下降；可见，百草枯可通过诱导细胞凋亡而损伤大鼠肺组织。
2．二巯丙黄钠保护可明显减低百草枯急性中毒大鼠肺组织CytcmRNA和caspase-3mRNA表达水平，可见，二巯丙黄钠可以抑制百草枯引起的细胞凋亡而对肺产生保护作用。