【摘 要】
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目的:DCs是体内最重要的抗原提呈细胞,在肿瘤免疫治疗中起关键作用。胃癌细胞缺乏特异性肿瘤抗原且抗原性弱,以往的研究手段如癌细胞冻融超声粉碎、癌酸洗抗原以及肿瘤细胞DN
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目的:DCs是体内最重要的抗原提呈细胞,在肿瘤免疫治疗中起关键作用。胃癌细胞缺乏特异性肿瘤抗原且抗原性弱,以往的研究手段如癌细胞冻融超声粉碎、癌酸洗抗原以及肿瘤细胞DNA、RNA转染DCs等刺激DCs激发后续抗肿瘤免疫应答的能力较弱。本实验从脐血诱导分化成熟DCs,采用PEG细胞融合技术将DCs与SGC7901胃癌细胞进行融合,研究异体DCs-胃癌融合瘤苗的生物学特性及其体外抗胃癌免疫应答效果,为该疫苗进一步的体内研究和临床应用奠定基础和提供理论指导。方法:从婴儿脐血中采用贴壁培养方法获取单个核细胞,利用rhGM-CSF、rhIL-4、TNF-a体外定向分化诱导获取成熟DCs。在PEG的作用下将其与SGC7901胃癌细胞融合,贴壁培养方法获得纯净融合细胞。利用光镜电镜和染色技术观察脐血来源DCs以及胃癌-DCs融合疫苗的形态学特性;SP免疫组化方法和流式细胞术对DCs和融合细胞表面分子的表达进行检测;混合淋巴细胞反应观察DCs和融合细胞激活T淋巴细胞的增殖能力;MTT比色法检测DCs和融合疫苗体外杀伤胃癌细胞的细胞毒作用。结果:健康婴儿脐血单个核细胞体外定向诱导分化可获得具备典型特征的DCs,在PEG的诱导下DCs和SGC7901胃癌细胞成功融合。免疫组化显示融合细胞表现胃癌和DCs双表型特性,既表达肿瘤标记物CEA,
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