【摘 要】
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蚕丝的主要成分是丝素蛋白,丝素蛋白中富含多种氨基酸,具有多种生理活性与药用功能.丝素的利用价值受其分子量大小的影响,控制丝素水解到适宜的分子量水平是丝肽发挥生理功能
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蚕丝的主要成分是丝素蛋白,丝素蛋白中富含多种氨基酸,具有多种生理活性与药用功能.丝素的利用价值受其分子量大小的影响,控制丝素水解到适宜的分子量水平是丝肽发挥生理功能的关键.该实验以工厂下脚料废丝为原料,将其浸泡、除杂后,按1:50(w/v)的加量加入0.5％Na<,2>CO<,3>溶液,煮沸脱胶,用1:15(w/v)加量的42％CaCl<,2>溶液煮沸溶解丝素,经脱盐后制得丝素蛋白溶液.比较胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶(Alcalase)、复合风味蛋白酶(Flavorzyme)及复合蛋白酶(Protemax)对丝素的水解作用,选择效率最高的碱性蛋白酶作为水解丝素蛋白用酶.为改善水解液风味,提高原料利用率,同时选用复合风味蛋白酶,进行双酶分步水解及复合水解丝素蛋白工艺的研究,通过单因素实验和正交实验优化酶解丝素的工艺条件.实验最终确定双酶复合酶解丝素蛋白的工艺为:碱性蛋白酶和风味蛋白酶各按0.5％和1.5％(E/S,w/w)的加量,在55℃,pH6.5(接近丝素溶液的自然pH)的条件下,共同水解7％的丝素蛋白溶液.水解7h后,水解度(DH)达35.02％,水解液中氨基氮含量为4.919g/l,多肽含量为55.57g/l,平均肽链长度(APCL)为2.86个氨基酸残基,水解率为79.43％(w/w).将水解液用截留分子量为10000、5000、3000和1000的超滤膜超滤,分离得到几种分子量范围不同的级分,并用它们做调节机体免疫力的动物实验.用SDS-PAGE电泳的方法初步分析各丝肽级分分子量的分布情况,高效液相色谱法(HPLC)分析它们的氨基酸组成和含量.通过比较几组水解产物分子量的分布情况和氨基酸特性,最终得出结论为:在该实验确定的最佳条件下复合酶解丝素蛋白,得到水解度达35.02％的水解液,从中分离出一组具有调节机体免疫功效的丝肽产物,其分子量分布在1000~6000范围内,且该级分中Gly、Ser、Cys和Ile的含量相对较高.
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