根癌农杆菌介导的腺嘌呤二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因异入马铃薯的初步研究

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马铃薯(Solanum tuberosum L.)是重要的淀粉类作用,其淀粉的合成一直是研究的重点.在淀粉合成中腺嘌呤二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)是一个关键性的酶,由它所催化的反应是淀粉合成的一个限速反应.AGPase又是一个变构调节酶,其活性受变构调节因子影响极大.AGPase基因的突变子Glgc16所编码的AGPase较少依赖变构调节,因而能发挥较高的催化活性.我们引入这个突变子,并将携带该基因的根癌农杆菌与云南生产上的马铃薯栽培品种的叶片、茎段、试管薯共培养,获得了转基因植株,并由此建立了一种实用、快速和高效的遗传转化体系.在实验中我们发现培养基渗透势、植物激素、AgNO<,3>、活性碳等因素影响了转化的进行,不同的马铃薯品种的转化率也有很大的差异.在分化培养基中增加培养基的渗透势和加入活性碳、GA<,3>、AgNO<,3>能明显的提高愈伤组织的质量,进而提高分化率,另一方面,共培养前农杆菌菌液的浓度、稀释方式及外植体的取材部位,也是影响转化的重要因素.
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