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目的:本课题的研究目的在于采用Reyers法实行大鼠下腔静脉部分结扎术,复制大鼠深静脉血栓(DVT)模型,对DVT大鼠于造模前20日起至造模前1天止,每24小时灌胃给予三七粉1次,同时在造模后多个相同的时间点通过制备病理切片(HE法)及检测观察大鼠血液中D-二聚体、纤维蛋白原(FIB)的水平以监测不同分组DVT大鼠血栓发生发展情况,以ELISA法监测大鼠血液中IL-6、IL-8的含量水平变化并探究三七粉对DVT大鼠术后凝血功能紊乱及深静脉血栓形成的预防作用,期待有机会采用一种更加安全且效果良好的中药方案预防手术创伤后凝血功能紊乱及深静脉血栓以弥补低分子肝素钙等传统一二代抗凝药物的缺憾之处,探讨预先应用三七粉对术后DVT大鼠早期的抗凝血作用,从而为临床上三七粉应用于手术相关性凝血异常及DVT的预防提供理论和实验依据。 方法:总共饲养SPF级雌性SD大鼠96只,体重范围是180-220g,随机分为四组,分别是正常对照组、假手术组、模型组、三七粉组,除正常对照组只有6只以外其余各组均有30只。经常规腹腔麻醉后沿腹正中线逐层开腹,假手术组仅寻找到下腔静脉与左肾静脉,仔细游离左肾静脉与下腔静脉汇合处后关腹。模型组行下腔静脉造模术造模,三七粉组在行下腔静脉造模术前20日起至造模前1天止,每24小时灌胃给予三七粉(0.7g/kg)1次。除正常对照组以外其余各组又按术后3h、6h、12h、24h、48h共5个时间点分为5个亚组,每亚组6只,分别对5个时间点各个亚组大鼠抽取腹主动脉血液做凝血功能检查以及ELISA测定,测定大鼠血液的D-二聚体、Fib、IL-6、IL-8含量。同时取下腔静脉段血管标本以HE法制作光镜病理切片。 结果:(1)假手术组的D-二聚体、Fib、IL-6、IL-8,在造模成功后有一个快而短的升高趋势,在3h时达到最高峰,而后迅速回落。仅在手术分离部位周围出现少量炎性细胞及部分内皮细胞肿胀,随时间的增长而肿胀程度逐渐增加。(2)模型组的D-二聚体、Fib、IL-6、IL-8等在造模后3~24h表现为逐渐升高(p<0.05或p<0.01),与假手术组同时间点相比,差异有明显统计学意义(p<0.05)。随着时间推移,血栓形成的局部血管壁中炎性细胞数量明显增多,以管壁为趋向,周围组织炎性细胞也显著呈现集中式增多,局部血管成纤维细胞增生更加明显,可看到内皮细胞明显增生。(3)与模型组比较,同时间点的三七粉组D-二聚体、Fib、IL-6、IL-8与假手术组相比升高显著,说明三七粉组造模后凝血指标明显变化,与模型组相比升高程度明显降低,差异明显有统计学意义(p<0.05或p<0.01)。 结论:(1)使用下腔静脉结扎术的手术方法来创造动物模型可以成功建立DVT大鼠模型。(2)预防性使用三七粉能够有效缓解大鼠血液的高凝状态及减轻相关的全身炎性反应,进而延缓大鼠DVT的发生发展。