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土霉素是由链霉菌产生的一种广谱抗生素,因其具有促进生长和治疗疾病的作用,被广泛应用于饲料添加剂,是防治患病禽畜的常用药物,长期滥用会使动物组织中土霉素残留超标,直接危害人类健康。本试验以1日龄雏鸡为试验对象,在40日龄时采用单因素完全随机四水平试验设计,将试验动物分为四组,对照组、低剂量组(20mg/kg.bw.d)、中剂量组(50mg/kg.bw.d)和高剂量组(400mg/kg.bw.d),按照设计剂量连续7d在日粮中添加土霉素,混饲口服给药。通过测定给药后鸡增重率、肌肉中营养元素含量和土霉素残留量,研究土霉素在鸡体内的残留消除规律和不同残留水平下对肌肉营养元素的影响,为兽药的合理使用、残留标准的制定、风险评估和预测提供科学依据。1、建立了鸡肉中土霉素残留的高效液相色谱检测方法,研究土霉素在肌肉组织中的残留消除规律。高效液相色谱条件:流动相为0.01mol/L三氟乙酸-乙腈混合溶液(80:20,v/v),柱温30℃,进样量50μl,检测波长350nm,流速1ml/min。该方法的灵敏度,检测限为8μg/kg,定量限为18μg/kg,回收率在90.2%~107.8%之间,变异系数均低于10%,符合残留检测的要求。以多次口服方式给药,研究土霉素在肌肉组织中的残留消除规律,结果显示:土霉素在鸡肉中的药物浓度-时间曲线符合一级吸收一室模型,药动学参数(Pharmacokinetic parameters)为:吸收速率常数(Ka)0.017h-1,消除速率常数(Ke)0.009h-1,吸收半衰期(T1/2Ka)40.1h,消除半衰期(T1/2Ke)74.1h,达峰时间(Tmax)77.5h,药峰浓度(Peak concentration,Cmax)157.2μg/kg,曲线下面积(Area under the time concentration curve,AUC)34686μg*h/kg。土霉素在鸡体内的药动学表现为,吸收迅速,组织分布广泛,消除较慢。2、对四组试验鸡按照设计剂量口服混饲土霉素,在给药前和给药7d后测量鸡体重,计算增重率,结果表明:对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组鸡增重率分别为:25.5%、32.6%、35.9%和17.8%。低剂量和中剂量组鸡增重率高于对照组,差异极显著(P<0.01),土霉素表现出明显的促生长作用,高剂量组的鸡增重率低于对照组,与对照组差异显著(P<0.05),高剂量下土霉素表现出一定的生长抑制作用。3、对四组试验鸡按设计剂量连续7d口服混饲土霉素,分别在给药的第2d、4d、6d、8d、11d、13d、15d、18d和20d采鸡胸肌,测定肌肉中粗蛋白、粗脂肪和矿物质元素含量以及土霉素残留量。结果表明:低剂量和中剂量组肌肉中蛋白质含量高于对照组,差异极显著(P<0.01),而高剂量组蛋白质含量低于对照组(P<0.05),土霉素不同残留量对蛋白质含量影响不同;肌肉中脂肪含量的变化与蛋白质相似,低剂量和中剂量组脂肪含量高于对照组,差异极显著(P<0.01),高剂量组脂肪含量低于对照组,差异显著(P<0.05);矿物质元素含量显示,含有土霉素组的肌肉中,铜(Cu)、铁(Fe)、镁(Mg)、锌(Zn)、钙(Ca)五种矿物质元素均有一定程度下降,其中对于铜元素,低剂量和中剂量组变化不明显,差异不显著(P>0.05),高剂量组极显著(P<0.01);对于铁元素,低剂量组较对照组差异不显著(P>0.05),中剂量和高剂量组与对照组相比差异极显著(P<0.01);肌肉中锌含量的变化,除高剂量组差异极显著外(P<0.01),其他剂量组无明显变化(P>0.05);肌肉中镁含量的变化,中剂量和高剂量组与对照组相比差异显著(P<0.01),低剂量组无明显变化(P>0.05);肌肉中钙含量变化明显,给药组与对照组相比均差异极显著(P<0.01)。4、以肌肉中土霉素残留量为自变量,各营养元素含量为因变量,进行回归分析,拟合回归方程,结果表明:以二次曲线为数学模型拟合方程,相关系数均大于0.8,显著水平(P<0.05),拟合度高。低剂量下土霉素的促生长作用明显,继续增加用药量,促生长作用增加不明显,而且随着用药量继续增加,土霉素逐渐表现出抑制作用;矿物质元素的变化规律表明,在这五种元素中,土霉素对钙含量和镁含量的影响最大。随着土霉素的消除,各剂量组营养元素的含量逐渐接近,表明土霉素的影响力在减弱。本研究建立的土霉素残留检测方法,检测限低,操作方法简便,重现性好,适合动物源性食品中土霉素残留的监控,建立数学模型研究土霉素不同残留水平下对鸡肉营养元素的影响,对鸡肉的安全食用、土霉素在鸡饲料中的安全使用,提供科学依据,具有较高的理论价值和良好的应用前景。