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目的: 支气管哮喘是一种以可逆性气流受限为特征的气道慢性炎症性疾病，主要表现为气道平滑肌功能障碍引起的反复发作性喘息、气急、胸闷、咳嗽。目前在哮喘终端效应细胞气管平滑肌上已经发现多种治疗靶标。课题组前期发现Transgelin-2是针刺抗哮喘调控因子MT-2在气道平滑肌的作用靶标，但该靶标在针刺抗哮喘中的作用仍不清楚，通过对针刺抗哮喘靶标Transgelin-2基因敲除小鼠哮喘模型的影响研究，以期明确该靶标在哮喘发病中作用。 方法: 1.课题组前期构建了C57BL/6品系背景的肌动蛋白结合蛋白2(Transgelin-2)基因敲除小鼠，并利用PCR剪尾法鉴定Transgelin-2基因敲除小鼠基因型，上游引物是5-GTGCATCATCATCATCATCATGCAAATCGTGGTCCGAGCTATG-3，下游引物是5-AGACTGCAGGTCGACAAGCTTTACAGAATCTGACGAGGCATACC-3。 2.给予针刺抗哮喘靶标Transgelin-2基因敲除小鼠腹腔注射卵白蛋白(OVA，100μg/只，0.1 mg)与氢氧化铝(Al(OH)3)生理盐水(NS)混合剂致敏，14天后雾化吸入0.4％卵白蛋白(OVA，100μg/只，25μl)激发哮喘，建立哮喘模型。利用动物肺功能分析系统(Resistance and Compliance system)检测呼吸功能中气道阻力和肺顺应性的变化，研究该基因敲除小鼠在哮喘模型制备中的呼吸功能改变。 3.在小鼠哮喘模型OVA激发前10min分别雾化吸入Transgelin-2重组蛋白、β2肾上腺素能受体激动剂特布他林(TB)、针刺抗哮喘活性小分子CAT12等，比较Transgelin-2基因敲除小鼠哮喘模型呼吸功能改变。 结果: 1.根据鉴定标准，可采用PCR法准确区分Transgelin-2基因敲除小鼠、野生型小鼠和杂合子小鼠。 2.针刺抗哮喘靶标Transgelin-2基因敲除小鼠哮喘模型组(KOAS)5个检测时间点相比，气道阻力显著上升，P＜0.01;30min，40min和50min气道阻力改变值和10min相比，有显著统计学差异，P＜0.05; KOAS模型组和KO_NS组小鼠相同时间点气道阻力改变值差别，发现20min，30min和40min等3个时间点有显著统计学差别，P＜0.05，提示针刺抗哮喘靶标Transgelin-2基因敲除小鼠哮喘模型气道阻力显著增高，造模成功。KOAS模型组和KO_ NS组小鼠相同时间点肺顺应性改变值差别，发现10min，20min和30min等3个时间点有显著统计学差别，P＜0.05，提示针刺抗哮喘靶标Transgelin-2基因敲除小鼠哮喘模型肺顺应性显著降低。 3.野生型小鼠哮喘模型组(WTAS)5个检测时间点相比，气道阻力显著上升，P＜0.01;50min气道阻力改变值和10min相比，有显著统计学差异，P＜0.05;WTAS模型组和WT_NS组小鼠相同时间点气道阻力改变值差别，发现10min，20min，30min，40min和50min等5个时间点有显著统计学差别，P＜0.05，提示野生型小鼠哮喘模型气道阻力显著增高，造模成功。WTAS模型组和WT_ NS组小鼠相同时间点肺顺应性改变值差别，发现5个时间点均无显著性差别，P＞0.05。 4.针刺抗哮喘靶标Transgelin-2基因敲除小鼠哮喘模型组(KOAS)与野生型小鼠哮喘模型组(WTAS)的相同时间点气道阻力改变值相比，30min气道阻力改变值有显著性差别，P＜0.05，提示针刺抗哮喘靶标Transgelin-2基因敲除后，哮喘模型气道阻力改变值显著升高，Transgelin-2基因在哮喘发病机制中起关键作用。 5.以模型组，即以KOAS模型组为基准，其它组全部按比例计算。KOAS模型组和KO_NS组嗜碱性粒细胞百分比(Bas％)P值为0.036(P＜0.05)，有显著统计学差异。提示Transgelin-2基因敲除后可以引起哮喘模型小鼠嗜碱性粒细胞(Bas)明显升高，较基因敲除小鼠生理盐水对照组升高了290％。 6.WTAS模型组和WT_NS组淋巴细胞百分比(Lym％)P值为0.049(P＜0.05)，有显著统计学差异。提示野生型小鼠哮喘造模激发后淋巴细胞较正常小鼠明显降低，但嗜碱性粒细胞(Bas)较正常小鼠升高了250％。KOAS模型组和WTAS模型组两组间小鼠肺泡灌洗液白细胞五分类计数比较无区别。 7.KOAS_TAGLN2组和KOAS模型组小鼠相同时间点气道阻力改变值在20min，30min和40min等3个时间点有显著统计学差别，P＜0.05，提示对于针刺抗哮喘靶标Transgelin-2基因敲除小鼠哮喘模型，雾化给予1μg/kg小鼠Transgelin-2蛋白能够显著降低哮喘模型气道阻力。KOAS_ TAGLN2组和KOAS模型组小鼠相同时间点肺顺应性改变值相比发现10min，20min和30min等3个时间点有显著统计学差别，P＜0.05，提示雾化给予1μg/kg小鼠Transgelin-2蛋白可显著改善针刺抗哮喘靶标Transgelin-2基因敲除小鼠哮喘模型肺顺应性。 8.WTAS_ TAGLN2组和WTAS模型组小鼠相同时间点气道阻力改变值在10min，20min，30min，40min和50min等5个时间点均有显著统计学差别，P＜0.05，提示雾化给予1μg/kg小鼠Transgelin-2蛋白能够显著降低野生型小鼠哮喘模型气道阻力。WTAS_ TAGLN2组和WTAS模型组小鼠相同时间点肺顺应性改变值差别相比发现5个时间点均没有显著统计学差别，P＞0.05。 9.针刺抗哮喘靶标Transgelin-2基因敲除小鼠哮喘模型组和野生型小鼠哮喘模型组给予1μg/kg小鼠Transgelin-2蛋白雾化吸入后，相同时间点气道阻力改变值，均没有显著性差别，P＞0.05，提示雾化给予1μg/kg小鼠Transgelin-2蛋白能有效降低哮喘模型气道阻力。基因敲除小鼠与野生型小鼠哮喘模型组给予1μg/kg小鼠Transgelin-2蛋白雾化吸入组小鼠在相同时间点肺顺应性改变值相比，5个时间点肺顺应性改变值没有显著性差别，P＞0.05。 10.以模型组，即KOAS模型组为基准，其它组全部按比例计算。KOAS模型组和KOAS_ TAGLN2组小鼠淋巴细胞百分比(Lym％)P值为0.05(P=0.05)，有显著统计学差异。提示雾化给予1μg/kg小鼠Transgelin-2蛋白组相比较针刺抗哮喘靶标Transgelin-2基因敲除小鼠哮喘模型的淋巴细胞明显升高。 11.WTAS_ TAGLN2组和WTAS模型组小鼠相比，白细胞计数(WBC)P值为0.009(P＜0.05)，淋巴细胞百分比(Lym％)P值为0.002(P＜0.05)，有显著统计学差异。提示雾化给予1μg/kg小鼠Transgelin-2蛋白组相比较野生型小鼠哮喘模型组的白细胞计数总数明显降低，原来升高的嗜碱性粒细胞(Bas)减少了50％，但淋巴细胞相对野生型小鼠哮喘模型组明显升高。 12.KOAS_ TAGLN2组和WTAS_TAGLN2组相比白细胞(WBC)P值为0.006(P＜0.05)，有显著统计学差别。提示雾化给予相同浓度剂量1μg/kg小鼠Transgelin-2蛋白后，基因敲除小鼠哮喘模型和野生型小鼠哮喘模型的白细胞计数总数相比有明显区别，可以使WTAS_TAGLN2组白细胞总数较KOAS_TAGLN2组明显降低，WTAS_TAGLN2组嗜碱性粒细胞(Bas％)较KOAS_TAGLN2组降低了46.8％。 13.KOAS_TB组和KOAS模型组小鼠相同时间点气道阻力改变值差别在20min，30min,40min和50min等4个时间点有显著统计学差别，P＜0.05，提示对于针刺抗哮喘靶标Transgelin-2基因敲除小鼠哮喘模型，雾化吸入10μg/kgβ2受体激动剂特布他林(TB)仍然能够显著降低哮喘模型气道阻力。KOAS_ TB组和KOAS模型组小鼠相同时间点肺顺应性改变值差别在20min时间点有显著统计学差别，P＜0.05，提示雾化吸入10μg/kgβ2受体激动剂特布他林可显著改善针刺抗哮喘靶标Transgelin-2基因敲除小鼠哮喘模型肺顺应性。 结论: 1.针刺抗哮喘靶标Transgelin-2在哮喘发病中起关键作用。Transgelin-2基因小鼠哮喘模型出现气道阻力增高，肺顺应性降低，肺泡灌洗液嗜碱性粒细胞数量增加。 2.给予Transgelin-2蛋白，可显著降低基因敲除和野生型小鼠哮喘模型气道阻力;改善基因敲除小鼠肺顺应性;使淋巴细胞升高回复正常水平，可降低野生型小鼠嗜碱性粒细胞数量。 3.给予特布他林能显著降低基因敲除和野生型小鼠哮喘模型气道阻力，改善基因敲除小鼠哮喘模型肺顺应性;使淋巴细胞升高回复正常水平，可降低基因敲除型和野生型小鼠嗜碱性粒细胞数量。 4.针刺抗哮喘活性小分子CAT12能显著降低野生型小鼠哮喘模型气道阻力，降低Bas数量，而不能降低Transgelin-2基因敲除小鼠模型气道阻力和嗜碱性粒细胞数量。