论文部分内容阅读
目的:应用淋巴瘤荷瘤小鼠动物模型，研究TLR7激动剂SZU-101与传统化疗药物多柔比星联合使用对治疗效果的影响，并探讨联合使用的TLR7激动剂SZU-101的最佳用药剂量和给药方式。 方法:细胞实验:荧光标记示踪方法研究SZU-101能否进入细胞质;TLR7-NF-κB报告系统检测SZU-101激动剂对TLR7信号通路的激活;免疫荧光标记技术和流式细胞术检测SZU-101激活的免疫细胞类型;Western blot检测细胞内源TLR7的表达;AnnexinⅤ/PI双染色法检测SZU-101对淋巴瘤细胞凋亡的影响;MTS实验检测SZU-101对淋巴瘤细胞增殖的影响;流式细胞术检测SZU-101对淋巴瘤细胞细胞周期的影响。动物实验:酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠体内细胞因子的分泌;小鼠淋巴瘤动物模型的存活率和存活时间的研究;淋巴瘤荷瘤小鼠动物模型全身性抗肿瘤效果的研究;动物来源细胞共培养实验;细胞介导的细胞毒实验。 结果:1.SZU-101激动剂激活树突状细胞、B淋巴细胞和T淋巴细胞并分泌相应细胞因子。(1)SZU-101激活TLR7及其信号通路;(2)SZU-101能有效转运至细胞质中。(3)SZU-101能高效激活淋巴细胞，促进树突状细胞的成熟并增强其免疫反应能力。2.EL4细胞、A20细胞和TK-1细胞等淋巴瘤细胞系均表达内源TLR7，但SZU-101对EL4细胞无直接作用效果。3.SZU-101联合多柔比星增加淋巴瘤荷瘤小鼠的存活率，延长小鼠的存活时间。4.瘤内联合注射SZU-101和多柔比星产生系统性抗肿瘤效果。5.长期存活小鼠的淋巴细胞对共培养的EL4细胞产生强烈的免疫反应。6.SZU-101缓解小鼠在化学药物治疗过程中产生的副作用。 结论:(1)瘤内注射TLR7激动剂能增强传统化疗药物多柔比星的抗肿瘤效果。(2)SZU-101和多柔比星联合用药并瘤内注射的方法能产生大量的炎性因子，并且能增加细胞介导的细胞毒杀伤作用。(3)SZU-101和多柔比星联合用药并瘤内注射的方法不仅对给药处肿瘤有很好的杀灭作用，对远端肿瘤也同样有强烈的杀灭作用。(4)确定了SZU-101联合多柔比星针对小鼠淋巴瘤治疗的最佳治疗剂量和给药方法。(5)SZU-101能有效定位于细胞质中，并激活TLR7受体信号通路。(6)SZU-101不能直接对EL4细胞产生直接的细胞学效应。