【摘 要】
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美网柄牛肝菌(Boletus reticulatus Schaeff)属于牛肝菌目(Boletales)、牛肝菌科(Boletaceae)、牛肝菌属(Boletus)。美网柄牛肝菌的子实体呈中等至大型,可食用而且味道鲜美。本文以四川省小金县野生美网柄牛肝菌为原料,探讨其子实体多糖的结构、免疫活性和抗肿瘤活性及机制。结果如下:(1)从四川省小金县采集的野生食用菌结合形态学特征与内转录间隔区(ITS)
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美网柄牛肝菌(Boletus reticulatus Schaeff)属于牛肝菌目(Boletales)、牛肝菌科(Boletaceae)、牛肝菌属(Boletus)。美网柄牛肝菌的子实体呈中等至大型,可食用而且味道鲜美。本文以四川省小金县野生美网柄牛肝菌为原料,探讨其子实体多糖的结构、免疫活性和抗肿瘤活性及机制。结果如下:(1)从四川省小金县采集的野生食用菌结合形态学特征与内转录间隔区(ITS)序列分析结果,将其鉴定为美网柄牛肝菌(B.reticulatus Schaeff)。(2)分离纯化后的均一多糖被命名为BRS-X,其分子量为150,935 Da。(3)综合傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、高效液相色谱(HPLC)、核磁共振(NMR)和气相色谱-质谱联用(GC-MS)实验结果,解析出BRS-X的结构是(1→6)-α-D-半乳糖为主链,在半乳糖的2位碳上连接的→4)-β-D-葡萄糖为支链,且半乳糖与葡萄糖的比例为5:1。(4)免疫活性实验结果表明,与空白对照组相比,药物组(BRS-X)能显著促进T细胞、B细胞和RAW264.7细胞的增殖活性。当BRS-X的浓度为20μg/mL时,对T、B细胞的增殖活性影响最大,增殖率分别达到38.88%、30.97%。而且与空白对照组相比,BRS-X能促进B细胞分泌免疫球蛋白。当BRS-X的浓度为10μg/mL时,对RAW264.7细胞的增殖活性和吞噬活性影响最大,增殖率达到122.49%,吞噬率达到67.74%。(5)体外抗肿瘤活性实验结果表明,与空白对照组相比,药物组(BRS-X)能显著抑制S180细胞的生长。当BRS-X的浓度为10μg/mL时,对S180细胞的抑制效果最强,抑制率为39.74%。体内S180肿瘤模型实验结果表明,药物组(BRS-X)有显著的抗肿瘤活性,其抑制率达到37.86%。(6)KEGG信号通路分析转录组测序结果,发现基因主要集中在丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路。肿瘤组织的酶联免疫吸附测定(ELISA)分析结果表明,药物组(BRS-X)中TNF-α、IL-1?的表达水平显著提高,VEGFR、VEGF、IL-6的表达水平显著降低。本文介绍了一种结构新颖的美网柄牛肝菌多糖(BRS-X)。经研究发现,BRS-X具有显著的免疫活性和抗肿瘤活性,而且已初步揭示其抗肿瘤活性的分子机制。以上研究有助于美网柄牛肝菌资源的开发与利用,为BRS-X的药用价值提供了科学依据。
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