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本论文重点研究了蚓激酶基因在大肠杆菌中的表达，并对工程菌发酵培养基及发酵条件进行了优化。主要研究结果如下：
应用PCR技术扩增获得蚓激酶成熟肽基因F238，并将其克隆至大肠杆菌质粒pET-22b（+）中，构建表达载体pET-F238。重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3），1.0mmol/LIPTG、37℃条件下诱导5h，经SDS-PAGE证实蚓激酶成熟肽蛋白获得了表达，所表达的蛋白产物以可溶性蛋白和包涵体两种形式存在，但主要以包涵体的形式存在，相对分子量与预期的26kDa相符。
为了实现蚓激酶基因在大肠杆菌中的可溶性表达，将PCR技术扩增获得蚓激酶基因F238克隆至大肠杆菌质粒pET22b-TrxA中，构建双顺反子表达载体PTrx-F238。重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3），1.0 mmol/L IPTG、37℃条件下诱导5h，经SDS-PAGE证实蚓激酶成熟肽蛋白获得了高效表达，所表达的蛋白产物相对分子量与预期的26kDa相符，且都是可溶性蛋白，表明分子伴侣TrxA起到了帮助目的蛋白正确折叠的作用。
以PTrx-F238/BL21为工程菌，用纤维蛋白平板法对蚓激酶的纤溶活性进行检测，初始酶活为141.6U/mL。本研究先利用单因素分析考察了碳源、氮源、玉米浆、无机盐等对重组菌发酵产酶的影响，然后用正交设计确定了发酵培养基的最佳产酶组成为：1％蔗糖，1％硫酸铵，0.8％玉米浆，0.01mmol/L氯化钙；并利用单因素确定最优发酵条件为：初始pH7.0，装液量20mL/2250mL三角瓶，接种量3％，加IPTG时间3h，诱导温度30℃，诱导时间6h，IFTG终浓度0.8mmol/L，最终酶活达到507.6U/mL。