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急性肺损伤(acute lung injury，ALI)是临床上危重病患者常见的严重并发症，是机体遭受严重感染、休克、创伤等多种原因打击时引起的以肺泡—毛细血管膜通透性增加为特征的肺部炎症综合征，发病急而顽固，甚至可以引起急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome，ARDS)和多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome，MODS)等严重结局。尽管目前对其认识和治疗措施有很大进展，但ARDS和MODS的病死率仍居高不下(40～60％)，治疗方面亟待取得重大突破。革兰氏阴性细菌细胞壁外膜的脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)是引起全身性炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome，SIRS)、ALI和ARDS的主要原因之一，肺脏是LPS最常累及和最先攻击的靶器官。中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophils，PMN)在机体非特异性防御反应中的地位毋容置疑，然而PMN又是革兰氏阴性细菌等病原菌引起炎症反应的重要效应细胞。近年大量研究证实：PMN在肺组织中大量扣押、过度激活和清除延迟在SIRS→ALI→ARDS→MODS这一恶性发展过程中作用重大。因而采取有效措施，适时适度清除不需要的，处于持续激活状态的PMN对于控制炎症反应的发展和转归至关重要，将会给SIRS、ALI和ARDS的治疗带来新的曙光。 目前认为细胞死亡有两种形式，即细胞凋亡(apoptosis)和细胞坏死(necrosis)。细胞凋亡是由基因控制的细胞“自杀”性死亡形式。二十世纪九十年代以来细胞凋亡的研究被推向生命科学的前沿，形成了一个几乎涉及生物医学各个领域的研究高潮。 PMN是分化终末细胞，寿命短暂。生理情况下衰老的PMN自发凋亡被吞噬细胞平稳识别清除而不引发炎症反应，对维持循环血中PMN数量的稳定具有重要意义。在感染或创伤等病理情况下PMN生 中文摘要 存时间延长，这种变化与炎症部位多种炎症因子对PMN凋亡的延迟 作用有直接关系。炎症部位PMN凋亡失控会导致PMN过量聚集、过 度激活，持续释放毒性内容物而加重炎症反应。在炎症性疾病的病理 生理学研究领域有关PMN凋亡的研究方兴未艾。己有资料显示病理 条件下凋亡的PMN细胞表面受体表达下调，由受体介导的脱颗粒、 呼吸爆发等致炎功能下降；凋亡的PMN细胞膜保持完整，能够避免 有毒内容物的释放；凋亡的PMN更易被吞噬细胞平稳识别、吞噬； 更有意义的是，通常吞噬细胞在吞噬坏死PMN之后要释放炎症介质， 但吞噬了凋亡的PMN后，能够产生和释放抑制炎症的介质。这种凋 亡和清除间的动态平衡既防止了PMN的过度过量激活加重炎症反应， 又能够避免凋亡的PMN继发性坏死而释放毒性内容物来加重周围组织损伤。由此可见PMN凋亡作为非炎性清除PMN的方式，其启动的 时机和程度是影响ALI等多种炎症性疾病的程度和转归的重要因素。 细胞凋亡是一种细胞主动死亡的复杂过程，受到细胞内外多种因素的影响，同时受到多条信号转导通路的精确调控，这些通路的作用形式不同，彼此之间又存在着错综复杂的关系。各个信号转导通路之间相互作用、相互协调，形成一个复杂的网络，实现对细胞凋亡的精密、准确调控。明确调控PMN凋亡信号转导通路的组成、作用及其相互关系，无疑是揭示PMN凋亡本质并进行干预的重要突破口。核因子－卜B（nuclearfacto。h，NF－h）作为一种重要的核转录因于，是多个信号通路的交汇点，在调控细胞凋亡中的作用近年来颇受学者关注并成为最活跃的研究领域之一。NF－h的激活在多种细胞起着抑制凋亡，延长生存时间的作用。Ward提出W－h信号转导通路有望成为调控PMN凋亡的重要干预靶位。但关于NF－h在PMN凋亡失控引起炎症性疾病中的调控作用目前尚未得到系列深入的研究。 综合分析现有资料，我们发现有关PMN凋亡失控在LPS引起的ALI中的作用、在LPS延迟PMN凋亡过程中何种信号转导途径起主要调控作用以及对此如何加以干预以控制ALI的发生和发展，这一系列的间题目前尚无明确答案。本课题试图利用气管内滴注LPS致ALI的动物模型和体外分离培养的人血PMN，从整体、细胞和分子水平系统地研究PMN凋亡失控在LPS引起的ALI中的重要地位，并进一步 2 中文摘要 探讨NF－h信号转导通路的多个环节在调控PMN凋亡中的作用，以 期为上述问题找到答案，为临床防治炎症性疾病提供新的思路。 IPMN凋亡失控在LPS致急性肺损伤中的作用及发生机制 1．1！L－10抗LPS所致急性肺损伤时PMN凋亡及NF’．KB的变化 目的：研究 IL刁 抗气管内滴注 LPS所致急性肺损伤时 PMN的凋亡 及M－IcB的变化。方洁：采用气管内滴注LPS复制SD大鼠ALI模型。 分为3组，n叶，①假手术＊ham）组：仅滴注无菌生理盐水；②LPS 组：每只大鼠气管内滴注 LPS 00pg；③LPSnL刁 0组：每只大鼠同 时滴注 LPS 00屹和 IL