论文部分内容阅读
目的：反复自然流产(RSA)是妊娠早期最常见的并发症之一，一般是指一对夫妇发生两次或两次以上的流产。文献报导发生率为0.4-1.0％，占所有妊娠丢失的15-20％，据报道国外不明原因的反复流产约为50％，国内约为50-75％。给患者及家庭造成了心理创伤和经济负担。不明原区 RSA发病的病因及机制是目前研究的热点。血管内皮生长因子(VEGF)是一种作用于血管内皮细胞的多功能因子，具有强大的促血管生成作用。在人体代谢旺盛的组织如胚胎组织、胎盘、增生期子宫内膜、黄体等，VEGF常高水平表达，以满足生长发育的需要。VEGF功能异常、表达缺乏，可引起胚胎种植、胎盘形成障碍等，是造成自发流产的重要原因之一。有报道显示RSA患者血清和蜕膜组织中VEGF及受体表达低于正常妊娠者，可致血管生成不足而引发流产。另有研究发现RSA患者血清VEGF的含量明显高于正常对照组，认为由于VEGF的异常增高可致流产。而H前尚没有研究其早期绒毛中VEGF的表达及其与血清中VEGF水平的相互关系。本研究目的通过测定反复自然流产忠者绒毛、蜕膜及血清中VEGF的表达，观察其绒毛的超微结构，并与正常人工流产组(对照组)进行比较，探讨不明原因反复流产患者的流产病因及发生机制。
方法：选择2006年3月.2006年12月在河北医科人学第二医院生殖医学科门诊就诊的20-35岁反复流产患者24例为实验组。病例选择条件：发生过二次或二次以上自然流产；孕周<12周；无其他急、慢性病史；排除：1、染色体异常；2、内分泌异常；3、子宫畸形；4、血栓形成倾向；5、免疫因素；6、感染因素。随机选取同期在河北医科大学第二医院妇产科要求人工流产的孕周<12周，年龄在20-35岁正常女性20例为对照组。所有研究对象于行人工流产术前抽取外周肘静脉血，分离血清后，冻存于-20℃冰箱内待测VEGF。人工流产术后所得绒毛及蜕膜组织用生理盐水冲洗后，部分绒毛立即放入2.5％戊二醛液中固定，常规脱水、干燥镀膜，扫描电镜(日本JSM-5600LV)观察绒毛的超微结构；部分绒毛及蜕膜立即放入4％多聚甲醛液中固定，常规脱水、石蜡包埋、统一切片，HE、免疫组织化学染色，观察结果(采用4级半定量积分法进行结果判定)。
结果：
1 年龄、妊娠天数、孕囊直径的比较：实验组与对照纠.平均年龄分别为29.1±4.0岁、26.7±4.3岁；妊娠天数分别为63.6土12.4天、56.2±19.8天；孕囊直径分别为25.72±11.82mm、26.10土10.82 mm；比较无统计学意义(p>0.05)。
2 血清VEGF水平的比较：实验组与对照组平均血清VEGF分别为106.32±17.26pg/ml、88.26±10.15 pg/ml。RSA组高于正常对照组，差异有统计学意义(p<0.01)。
3 VEGF在绒毛中的表达结果：
绒毛中VEGF阳性表达主要定位于胞浆，呈棕黄色颗粒或线状，同时有少量细胞膜及细胞间质着色。正常绒毛组织滋养细胞着色呈细小均匀的浅黄色：RSA组滋养细胞着色较深(图1、2)。RSA组绒毛中VEGF的表达高于对照组，差异有显著性(u=3.243，p<0.01)。
4 VEGF在蜕膜中的表达结果：
RSA组与对照组蜕膜中VEGF的表达无显著性差异(u=0.5766，p>0.05)。
5 血清VEGF与绒毛中VEGF的表达的相关性：实验组和对照组血清VEGF水平与绒毛VEGF的表达存在线性相关关系(r<,1>=0.8477，p<,1><0.05；r<,2>=0.7463 p<,2><0.05)。
6 血清VEGF与蜕膜中VEGF的表达的相关性：实验组和对照组血清VEGF水平与蜕膜VEGF的表达不存在线性相关关系(r<,1>=0.2820，p<,1>>0.05；r<,2>=0.2879，p<,2>>0.05)。
7 绒毛超微结构的观察：对照组绒毛组织的微绒毛呈毛绒样，其粗细均匀、长度一致，排列有序，个体问微绒毛形态，如粗细、长度及表面结构等略有差别。RSA实验组绒毛组织的微绒毛数量明显减少，分布不均匀，部分区域微绒毛稀少，甚至消失；微绒毛排列不整齐、形态不规则，微绒毛增粗、变短、末端圆钝，有水肿、断裂的现象；局部粘连密度增高，反光增强。
结论：
1 RSA患者血清VEGF水平及绒毛组织中VEGF的表达高于对照组，差异有显著性。RSA组与对照组蜕膜组织中VEGF表达无显著性差异。血清VEGF水平与绒毛组织VEGF的表达存在直线相关关系；血清VEGF水平与蜕膜组织VEGF的表达不存在线性相关关系。提示RSA的发生可能与患者血清VEGF水平和妊娠绒毛组织中VEGF表达增高有关。
2 RSA绒毛表现为微绒毛数量明显减少，分布不均匀，部分区域微绒毛稀少，甚至消失；微绒毛排列不整齐、形态不规则，微绒毛增粗、变短、末端圆钝，有水肿、断裂的现象。因此本研究认为RSA患者可能系孕早期胎盘绒毛发育异常，致使滋养细胞在发育过程中处于长期相对缺血缺氧状态致绒毛中VEGF的表达异常增加，从而引发胚胎细胞凋亡而致流产。