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目的: Erlotinib耐药会导致大量非小细胞肺癌病人的死亡。像EGFR，c-Met，Jak及AKT等激酶的激活及高表达均会导致药物耐受。多个FGFR及受体酪氨酸激酶抑制剂的开发都处于临床阶段。新藤黄酸是从藤黄属植物分离得到的单体小分子化合物，近来被徐宏喜教授课题组发现通过抑制JAK/STAT3通路诱导多个NSCLC细胞的死亡。本课题组旨在进一步研究新藤黄酸在如何抑制非小细胞肺癌及病人来源肺癌细胞方面的作用机制，以及针对耐药，联合用药进行探讨。 方法: 我们使用多个肿瘤细胞用CellTiter-GLO方法对中国藤黄属植物化合物进行了筛选，根据初筛结果，同时通过生物化学激酶实验及结构关系，评价了新藤黄酸对FGFR和相关的酪氨酸受体激酶的抑制效果，及它与激酶之间的作用机制。为便于研究耐药模型，我们用亚剂量erlotinib处理HCC827细胞获得了耐药细胞株，通过ddPCR和Western blot方法验证了耐药细胞株。通过ELISA，AlphaScreen，及Western blot研究了新藤黄酸对非小细胞肺癌(如HCC827，erlotinib耐药的HCC827，NCI-H1650)细胞内FGFR及其下游激酶的磷酸化。其次对非小细胞肺癌细胞（如HCC827，erlotinib耐药的HCC827，NCI-H1650），以及对erlotinib耐药的临床肿瘤细胞，给予新藤黄酸，erlotinib，以及它们的组合物，再用CellTiter-Glo，2D克隆形成，3D软琼脂实验以及Western blot方法检测了它们的细胞生长和FGFR的信号通路。同时分别对erlotinib敏感的细胞株和耐药的细胞株及病人组织来源的细胞，进行裸鼠成瘤实验，用肿瘤生长曲线，免疫组织化学和Western blot方法评估了新藤黄酸及其与erlotinib的组合药的抗肿瘤活性 结果: 通过对64个藤黄属化合物在多种肿瘤类型细胞株的筛选，发现了其中5个化合物有很强的抗细胞增殖和诱导细胞凋亡作用，而且抑制了jak-Stat3信号通路。根据结构关系，选取了新藤黄酸作为我们进一步研究的目标。生物化学激酶和细胞实验表明，新藤黄酸抑制了非小细胞肺癌细胞中FGFR及其下游的多个激酶，激酶结果表明新藤黄酸通过可逆的方式与FGFR1相互作用，相应也阐明了新藤黄酸是个非ATP竞争的FGFR1抑制剂。同时新藤黄酸抑制了erlotinib敏感的HCC827细胞和erlotinib耐受的HCC827及H1650细胞的增殖以及促进了它们的凋亡。在细胞增殖及克隆形成实验中，新藤黄酸与erlotinib的联合用药展示了更强的药效。机制研究显示新藤黄酸还抑制了FGFR信号通路中的多个激酶如FGFR，c-Met，FRS2等，在体外发挥了协同性地增强erlotinib对NSCLC的抗肿瘤效果。在HCC827和erlotinib耐药的HCC827动物模型中，新藤黄酸和erlotinib的联合用药都显著抑制了肿瘤的生长，而且几乎没有显示药物毒性。在肺癌病人组织来源的动物模型中(PDX)，新藤黄酸显著抑制了FGFR融合基因高表达且EGFR低表达的肿瘤细胞的生长。 结论: 通过肿瘤细胞株的筛选，揭示了活性氧杂蒽酮化合物具有诱导凋亡，抗细胞增殖作用的。而具有氧杂蒽酮化合物母核的新藤黄酸(GNA)也有类似的特性。因此我们进一步研究了新藤黄酸作为FGFR抑制剂来克服erlotinib给药的非小细胞肺癌的耐药，这为药物临床前开发提供了可靠证据，它们的联合用药可以增强erlotinib药效。