维生素C人体血浆浓度分析与制剂生物等效性评价

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目的:维生素C是人血浆中含量最高的水溶性维生素,不稳定的化学性质及其强极性特点,为其准确测定带来极大困难。本研究目的是建立适合大量血浆样本中维生素C测定的快速、稳定、准确的分析方法,并应用该方法测定健康受试者维生素C血浆浓度,为研究人体维生素C日摄入量提供依据,以及评价含维生素C制剂的生物等效性。 方法:以偏磷酸溶液沉淀血浆蛋白并提取血浆中维生素C,以ODS为固定相,HPLC-UV法测定人体血浆样本中维生素C含量。 在此基础上,测定了128名健康受试者的维生素C血浆浓度及14名健康受试者口服13天维生素C制剂前后的稳态浓度。并对复方制剂对乙酰氨基酚维生素C泡腾片中维生素C的生物等效性进行了评价。 结果:采用偏磷酸溶液处理血浆样本,可以使血浆中的维生素C保持12小时以上基本稳定,抗坏血酸色谱峰与杂质峰分离良好。对健康受试者的测定结果表明,被调查者的维生素C血浆浓度总体处于低限附近4.7±2.7μg/mL,多剂量每日补充200mg维生素C后的受试者,其稳态血药浓度由5.8±2.5μg/mL上升为12.4±1.9μg/mL,提高了近一倍,非常显著(P<0.01)。受试者单剂量口服含200mg维生素C的制剂A(泡腾片)和制剂B(分散片)后,血浆Tmax分别为2.7±0.6和3.1±1.1h,Cmax分别为6.89±1.92和7.89±3.13μg/mL(校正后),用梯形法计算,AUC0→t分别为89.3±35.2和90.8±25.5μg·h/mL(校正后)。以B制剂为参比,制剂A中维生素C的相对生物利用度为105.7±38.9%。经双单侧t检验,两种制剂的生物利用度无显著性差异(P>0.05)。 结论:本研究采用ODS色谱柱,建立了一种灵敏的测定血浆中维生素C浓度的HPLC-UV分析方法。本方法快速准确,适用性强,重复性好,可满足大样本血浆测定的要求。发现在日常生活中,存在维生素C摄入量不足的问题,每同200mg维生素C的摄入量是美国近年提出的推荐标准,相比较,我们应当提高对维生素C摄入的重视。生物等效性研究发现,两种制剂的维生素C生物利用度无显著性差异(P>0.05)。
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