具有抑菌活性中药的筛选及其化学成分的研究

• 作 者: 王涛
• 出 处: 长春中医药大学
• 发表日期: 2013年期
• 关键词: 罗汉果 细菌生物膜 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 化学成分

目的：利用大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的细菌生物膜模型筛选具有抑菌活性的天然药物；利用生物膜模型筛选出该药物的活性部位；并从活性部位分离出具有抑菌活性的单体化合物。方法：采用实验室已建立的细菌生物膜模型进行药物的筛选，即采用96孔板进行微量培养，通过结晶紫染色法染色，然后经过脱氧胆酸钠脱色法进行脱色，在一定波长下测定OD值。以细菌生物膜模型为指导，采用不同的提取分离方法富集药物的活性部位，采用中压硅胶柱层析、SephadexLH-20、中压C18柱分离等色谱方法对活性部位进行分离纯化，通过质谱（MS)、红外光谱（IR)、紫外光谱（UV)、核磁共振光谱GH-NMR、13C-NMR)等多种光谱分析手段对单体化合物的结构鉴定，并考察各单体化合物对细菌生物膜的影响。结果：利用细菌生物膜模型，筛选出对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有较好的抑制活性的四味中药，分别为罗汉果、黄芩、返魂草和五倍子；选取罗汉果继续考察，筛选出罗汉果的活性部位为罗汉果乙醇提取物过D101大孔树脂95%乙醇洗脱部分；从罗汉果活性部位分离得到六种单体化合物并解析出三种，分别为十六烷酸（PalmiticAcid)、环-(亮氨酸-异亮氨酸)和谷甾醇-3-0-葡萄糖苷，其中谷甾醇-3-0-葡萄糖苷首次从罗汉果中得到，环-(亮氨酸-异亮氨酸)和谷甾醇-3-0-葡萄糖苷有较好的抑菌活性。结论：通过本次实验进一步验证了BBF模型的科学性；通过对罗汉果的研宄，确定了罗汉果的抑菌有效部位，从中分离得到六种单体化合物并解析出三种，为罗汉果抑菌活性成分的进一步研宄打下基础。