泰州地区猪弓形虫血清流行病学调查及中药治疗急性感染弓形虫小鼠效果的研究

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弓形虫病(Toxoplasmosis)是由刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)寄生于人和动物的有核细胞中引起的一种人兽共患寄生虫病,呈全球性分布。弓形虫的宿主种类十分广泛,人和动物感染率都很高。人群的平均感染率25%-50%,但免疫功能正常的人一般呈隐性感染。猪感染弓形虫后可爆发疾病,引起的死亡率高达60%以上。其他家畜如牛、羊、马、兔、犬、猫、鸡和实验动物等也都能感染弓形虫,通常为隐性感染。该病严重危害人类健康和影响畜牧业的发展。目前治疗弓形虫病有效的药物有磺胺嘧啶、乙胺嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、阿奇霉素、螺旋霉素、克林霉素等,但均有较大的副作用。与西药相比,中药副作用较小,近些年有关中药治疗动物弓形虫病的研究报道很多,有些具有良好的治疗效果。为了了解泰州地区猪弓形虫感染情况及探寻有效的抗动物弓形虫中药,本研究开展了以下工作。1泰州地区猪弓形虫血清流行病学调查应用间接血凝试验(IHA)检测了泰州6个区、市(海陵、高港、姜堰、兴化、泰兴、靖江)775份猪血清。结果:血清样品中弓形虫抗体阳性数为59份,占总调查猪血清样品的7.61%;小型猪场阳性率为14.12%(34/241),规模化猪场阳性率为4.68%(25/534);小型猪场育肥猪、断奶仔猪、母猪阳性率分别为17.31%、9.78%、15.56%,规模化猪场育肥猪、断奶仔猪、母猪、公猪阳性率分别为6.25%、3.09%、5.26%、2.7%;海陵、高港、姜堰、兴化、泰兴、靖江地区猪血清抗体阳性率分别为7.26%、8.22%、6.20%、6.82%、9.6%、7.56%。结果表明:泰州地区6个区、市猪血清抗体阳性率相近;小型猪场阳性率比规模化猪场高;无论是小型猪场还是规模化猪场,育肥猪阳性率最高,母猪阳性率与育肥猪相近,公猪阳性率最低。该调查结果为泰州地区猪弓形虫病的防治提供了科学依据。25种中药对急性感染弓形虫小鼠治疗效果首先,测定感染小鼠致死量。然后,通过体内安全性试验确定各种药物治疗剂量。最后,评价5种中药对急性感染弓形虫小鼠的治疗效果,即:各药物组每只鼠经腹腔感染25个弓形虫速殖子后4 h,小鼠逐只经胃灌服剂量为25 g·kg-1的白牛胆、垂花香薷、黄皮叶或桦褐孔菌,或10.4 mg·kg-1蟾酥、200 mg·kg-1磺胺间甲氧嘧啶钠,每日2次,连用5 d,同时设感染不用药组与和空白对照组,以小鼠存活率与平均存活时间、腹腔液中虫体数、组织病变程度以及SOD活性等指标评价药物效果。结果显示,磺胺间甲氧嘧啶钠、蟾酥、桦褐孔菌、黄皮叶、白牛胆、垂花香薷组的存活率分别为66.67%、61.11%、50.00%、5.56%、0%、0%。蟾酥、桦褐孔菌与磺胺间甲氧嘧啶钠组的小鼠平均存活时间、腹腔液中虫体数和血清SOD活性相近,三者间无显著差异(P>0.05),均显著好于黄皮叶、白牛胆、垂花香薷和感染不用药组(P<0.05)。磺胺间甲氧嘧啶钠组和蟾酥组在肺脏仅出现肺泡隔毛细血管轻微充血,在肝脏和脾脏无明显病变或病变不明显;桦褐孔菌组的肝脏也无明显病变;其它治疗组的脾脏均有不同程度坏死。结论:蟾酥与桦褐孔菌的抗弓形虫效果与磺胺间甲氧嘧啶钠相近,白牛胆、垂花香薷和黄皮叶的抗弓形虫效果不明显。34种中药对急性感染弓形虫小鼠治疗效果首先,通过体内安全性试验确定各种药物治疗剂量。然后,评价4种中药对急性感染弓形虫小鼠的治疗效果,即:各药物组每只鼠经腹腔感染25个弓形虫速殖子后4h,小鼠逐只经胃灌服剂量为25 g·kg-1的桦褐孔菌、黄荆叶、鸡肫草、黄皮叶与200 mg·kg-1磺胺间甲氧嘧啶钠,每日2次,连用5 d,同时设感染不用药组与和空白对照组,以小鼠存活率与平均存活时间、腹腔液中虫体数、组织病变程度以及SOD活性等指标评价药物效果。结果显示,磺胺间甲氧嘧啶钠、桦褐孔菌、黄荆叶、鸡肫草、黄皮叶的存活率分别为61.11%、44.44%、38.89%、0%、11.11%。桦褐孔菌、黄荆叶与磺胺间甲氧嘧啶钠组的小鼠平均存活时间、腹腔液中虫体数和血清SOD活性相近,三者间无显著差异(P>0.05),均显著好于鸡肫草和感染不用药组(P<0.05)。磺胺间甲氧嘧啶钠组仅有轻微毛细血管充血、肺泡隔增宽等较轻病变;桦褐孔菌组与黄荆叶组肺泡中有散落红细胞、窦状隙充血和脾组织有少量坏死灶等病变;鸡肫草组与黄皮叶组多处肺泡中有散落的红细胞,肝核固缩、肝组织坏死、肝细胞水泡变性和脾组织坏死等较重病变;病变程度,黄皮叶轻于鸡肫草。结论:桦褐孔菌与黄荆叶的抗弓形虫效果与磺胺间甲氧嘧啶钠相近,黄皮叶抗虫效果稍差,鸡肫草抗虫效果不明显。4中药复方制剂治疗急性感染弓形虫小鼠的效果首先,通过体内试验测定由桦褐孔菌、黄荆叶、黄皮叶和甘草组成的中药复方的安全性。接着,比较不同剂量的中药复方制剂(35 g/kg、25 g/kg、15 g/kg)的疗效。最后,进一步验证治疗剂量的效果,即:每只鼠经腹腔感染25个弓形虫速殖子后4 h,鼠逐只经胃灌服25 g/kg中药复方制剂或200 mg/kg磺胺间甲氧嘧啶钠,每日2次,连用5 d,同时设感染不用药组与空白对照组,以小鼠存活率与平均存活时间、腹腔液中虫体数、组织病变程度以及SOD活性等指标评价药物效果。不同剂量治疗效果的比较显示,中药复方高剂量组、中剂量组与磺胺间甲氧嘧啶钠组的小鼠存活率、平均存活时间及腹腔液中虫体数相近,三者间差异不显著(P>0.05)。验证试验显示,中药复方制剂组(25 g/kg)与磺胺间甲氧嘧啶钠组(200 mg/kg)的小鼠存活率、平均存活时间、腹腔液中虫体数和血清SOD活性相近,两者间无显著差异(P>0.05),两者均能减轻肝、肺、脾的组织病变。结论:中药复方制剂具有一定的抗弓形虫效果,25g/kg的剂量效果最佳。
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