水稻矮缩病毒外壳蛋白P2与水稻蛋白相互作用的研究

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水稻矮缩病毒(Rice Dwarf Virus,RDV)是呼肠孤病毒科、植物呼肠孤病毒属的成员。该病毒是水稻矮缩病的病原,曾对我国水稻生产造成很大危害。水稻矮缩病毒的基因组由十二条双链RNA组成(分别命名为S1到S12),其中,由S2编码的P2是病毒的外壳蛋白。  以P2为诱饵,通过酵母双杂交筛选水稻cDNA文库,得到了两种与P2相互作用的蛋白片段。一种为水稻的IAA10蛋白,另一种是含有RING(ReallyInteresting New Gene) finger的蛋白。  OsIAA10蛋白为Aux/IAA家族的成员。这类蛋白具有转录抑制活性,它们通过与转录因子ARF(auxin response factor)相互作用,抑制ARF调控的下游基因的表达。Aux/IAA蛋白的第二个结构域是其泛素化降解的重要区域。研究结果表明,水稻矮缩病毒P2蛋白与OsIAA10的第二个结构域相互作用。无细胞体系降解实验证明,水稻IAA10蛋白在感病水稻蛋白提取物中的稳定性提高,抑制OsIAA10蛋白的泛素化降解。Real-time PCR结果显示,水稻Aux/IAA家族的另一个成员,OsIAA6,在RDV感染的水稻中转录水平下降,其在过表达OsIAA10的转基因水稻中有同样的变化。表明OsIAA6直接或间接受OsIAA10的调控,RDV感染造成OsIAA10蛋白稳定性提高,从而抑制了OsIAA6基因的转录。RDV感染干扰了由OsIAA10调控的生长素信号通路。  另一种与RDV P2相互作用的水稻蛋白是一种含有RING finger的蛋白(命名为OsHPR1),尚无文献报道这种蛋白的功能。本研究发现,OsHPR1具有E3蛋白-泛素连接酶活性,它与RDV P2蛋白相互作用,造成P2的泛素化降解,表明OsHPR1在水稻抗病毒过程中可能发挥作用。  
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