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白菜(Brassica campestris L.ssp.chinensis Makino)属于十字花科芸薹属白菜亚种,品种资源丰富,主要分布在我国南方地区,而南方酸性红壤的铝毒害却严重影响了其产量和质量。本研究通过开展白菜耐铝基因的克隆,以期通过基因工程手段获得白菜耐铝性新品种。这不仅为芸薹属作物的遗传改良奠定了基础,而且对实现红壤资源的高效利用具有重要的意义。本论文以矮脚黄白菜自交系(97-3-2)、黄心乌自交系(003-27)、上海青自交系(98-4-2)、黄芽菜自交系(97-8-6)、白蔓菁芜菁自交系(001-24)五个白菜自交系为材料,筛选白菜最耐铝基因型和最不耐铝基因型,采用cDNA—FFLP、Reverse Northern blot、RACE等优势互补的分子技术克隆白菜耐铝基因,研究结果如下：(1)对五种白菜自交系种子进行不同程度的铝胁迫处理,采用根相对伸长率测定法和苏木精染色法筛选出最耐铝基因型为矮脚黄,最不耐铝基因型为黄芽菜。(2)以矮脚黄自交系和黄芽菜自交系为材料,构建不同铝胁迫时期的白菜根尖RNA混合池,通过cDNA-AFLP技术筛选出5个耐铝相关的TDFs, reverse Northern blot验证均呈阳性。(3)4个TDFs测序成功：H-A7T12长485bp,与粳稻群组cDNA克隆同源性100%,编码的蛋白质与粳稻假拟蛋白的相似性100%；A-A8T17长271bp,与拟南芥烟酰胺腺嘌呤二核苷酸结合域蛋白mRNA同源性89%,编码的蛋白质与拟南芥黄素腺嘌呤二核苷酸/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸结合氧化还原酶相似性85%；A-A19T12长301bp,与小盐芥mRNA全长cds克隆同源性81%,编码的蛋白质与拟南芥抗性蛋白相似性94%。A-A10T8长300bp,与拟南芥二氢硫辛酰胺S乙酰基移转酶基因同源性100%,编码蛋白与二氢硫辛酰胺S乙酰基移转酶相似性100%,初步判断其通过调控细胞物质代谢来增强白菜耐铝性。(4) RACE技术结合巢式PCR,获得了A-A10T8基因全长序列1691bp,包含6个ORF,最大ORF位于299-1513之间,编码405个氨基酸。BLAST显示A-A10T8全长基因与二氢硫辛酰胺S乙酰基移转酶基因同源性100%,编码的蛋白质产物与二氢硫辛酰胺S乙酰基移转酶相似性100%。