生殖免疫的方药调节研究

来源 :北京中医药大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:yefenggege
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本课题总结过敏康II号胶囊临床治疗男性免疫性不育病例,分析过敏康II号胶囊对精子运动参数的影响,通过建立男性免疫性不育的动物模型,并观察过敏康II号胶囊对模型的治疗作用,初步探讨过敏康II号胶囊治疗男性免疫性不育的作用机理。本论文分为文献综述、临床实验室研究和实验研究三个部分。1 文献综述1.1 男性免疫性不育研究概况1.1.1 西医研究本病的发病原因是:由于各种原因,体内产生了针对精子的抗体,从而影响精子的正常功能,导致男性不育。临床诊断以不育男性的血清和(或)精浆中发现抗精子抗体(AsAb)为准。抗精子抗体主要有三种:IgA,IgG,IgM。AsAb导致不育的原因:1)AsAb具有凝集作用,影响精子的运动能力;2)AsAb具有细胞毒效应,影响精子的存活;3)AsAb干扰精子的代谢活动;4)AsAb影响精子获能和顶体反应;5)AsAb封闭顶体膜上的抗原位点,抑制精子对透明带的附着与穿透;6)AsAb对精子膜脂流动性的影响;7)AsAb影响胚胎发育。西医治疗主要采用免疫抑制治疗和辅助生殖技术。1.1. 2祖国医学对男性免疫性不育的认识 男性免疫性不育是一种自身免疫性疾病,在中医古文献中无相似的病名记载,现多数学者将其归属中医“不育”范畴。病因病机多因先天禀赋不足,或后天失调,湿热蕴结,精室受扰,影响生殖之精,故致不育。中医发挥自身优势在治疗男性免疫性不育方面做了大量的研究,也取得了很好的疗效。临床治疗方案中,既有辨证施治,亦有专病专方和其他疗法等。2 临床临床实验室研究采用过敏康II号胶囊治疗42例AsAb阳性患者,其中痊愈14例(33.33%),好转21例,无效7例,总有效率83.33 %。精子的活跃运动是精子独有的生物学特征,以前评估男性生育力的实验室参数主要依据精液常规检查,在分析精子功能和受精潜能方面提供的信息有限。本次观察采用计算机辅助精液分析技术对精液进行详尽分析,在中医药治疗本病的疗效观察中,尚属首次。在对精液分析的12个参数治疗前后值进行统计学对比时发现,治疗前,患者平均精液量、液化时间及精子密度属于正常,表明患者生精功能正常,而精子活率、精子活力以及精子多项运动参数降低,显示精子本身的功能状态下降,妨碍了受精过程的发生,由此,推测AsAb导致不育的主要机制之一可能为降低精子的活动能力,影响正常的精卵结合。过敏康II号胶囊可明显增加患者的精子密度(P<0.05)、精子活率(P<0.01)、精子活力(P<0.01);同时过敏康II号胶囊亦可显著改善精子运动参数,提高精子直线速度(P<0.01)、曲线速度(P<0.01)、平均路径速度(P<0.05)、精子直线运动率(P<0.05)、直线运动精子活率(P<0.01)、前向性(P<0.05)、侧摆幅度(P<0.05);结果表明,过敏康II号胶囊可消除由抗精子抗体所引起的精子凝集现象,减少抗精子抗体对生殖活动的不良影响;改善精子数量、质量,提高精子运动能力,进而达到患者治疗不育症的目的。<WP=4>3 实验研究3.1对正常动物免疫功能的影响取NIH雄鼠,按体重随机分为5组,正常组、对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组各12只。每日通过灌胃给药,持续10天,于末次灌药后次日摘眼球放血处死。本实验主要观察过敏康II号胶囊对正常小鼠体重及免疫器官影响,于处死前称量小鼠体重,将小鼠摘眼球放血处死后,摘取小鼠的胸腺、脾脏,称重,计算胸腺指数和脾指数。与正常组相比,中药及西药用药组动物胸腺指数、脾指数均低于正常组,由此推测过敏康II号胶囊可抑制正常小鼠免疫器官的生长,妨碍正常免疫器官功能,进而缓解过敏性疾病的症状。而醋酸泼尼松免疫抑制效果虽然不错,但其副作用很大,动物灌服醋酸泼尼松能明显降低动物的体重,显示醋酸泼尼松可抑制动物的正常生长发育。3.2 对免疫性不育动物模型的影响免疫性不育模型建立本实验造模方法参照赖安妮、宋济范等方法进行。取常规检查正常的人精液40份,2000转离心30min,弃精浆,精子用生理盐水洗涤5次,然后加入0.5%NP-40,震摇2h,15000转离心20分钟,取上清液加生理盐水,4°C透析,适当浓缩后,行考马斯亮蓝法测定蛋白浓度。用上述提取的精子膜抗原伴Freund完全佐剂,对小鼠进行腹腔免疫,每只小鼠注射抗原量为100μg,2周后用不完全Freund佐剂抗原加强免疫1次,每只小鼠注射抗原量为150μg,隔1周后以精子生理盐水抗原再加强免疫1次,每只小鼠注射抗原量为150μg。过敏康对免疫性不育模型鼠的治疗作用及其机理的初步探讨:分组与给药3.2.1 分组取NIH雄鼠,分为7组(正常组、佐剂组、模型组、对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组)造模第一天开始灌胃给药,每天一次,直至第30天。所有雄性小鼠与正常雌性小鼠按1︰2比例合笼2周,雌性小鼠再饲养5天后处死,剖腹观察雌鼠子宫着床点数,计算孕鼠平均着床点数。雄鼠于合笼2周后处死,进行实验。对照组所给药物为醋酸泼尼松片,高剂量组、中剂量组、低剂量组:所给药物为过敏康II号胶囊;3.2.3 检测指标;1)血清特异性抗体的测定2)对小鼠免疫器官影响3)孕鼠平均着床点数观察4)小鼠行为学观察5)?
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