LPS诱导鸡几个炎症反应相关基因的表达调控研究

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鸡大肠杆菌病是影响禽业生产的主要疾病之一,能够引起不同品系、不同日龄鸡多种组织脏器发生炎症反应,给养禽业带来巨大经济损失。本研究以大肠杆菌脂多糖(LPS)作用于海兰褐雏鸡、AA+肉雏鸡以及成年产蛋母鸡,分析炎症反应相关基因akirin2、PPARγ、NYGGF4以及mi RNA的表达特性,为深入理解炎症反应分子机制和分子诊断标记物候选基因的筛选提供理论参考。主要研究方法和实验结果如下:为深入研究雏鸡炎症反应中相关基因的表达特性和调控关系,本实验分别以AA+肉仔鸡和海兰褐蛋雏鸡为研究对象,采用LPS腹腔接种雏鸡,72h后收集血液、肝脏、胸腺、法氏囊和脾脏等组织,利用RT-PCR定量分析炎症相关基因akirin2、PPARγ和几种mi RNA的转录活性变化。结果表明:在LPS接种的肉仔鸡中,akirin2和PPARγ基因在肝脏和法氏囊中均显著下调(P<0.01);在LPS接种的海兰褐雏鸡中,akirin2基因在胸腺中表达显著上调(P<0.01),而PPARγ基因在各组织中表达均差异不显著;此外,mi R-146a(P<0.05)、mi R-21(P<0.01)和mi R-155(P<0.01)在LPS接种的2个品系雏鸡肝脏中表达均显著下调。雏鸡接种LPS后,在红细胞中,海兰褐雏鸡的mi R-155、mi R-146a、mi R-181a和mi R-21的表达活性均降低,而AA+肉鸡却呈现相反的表达趋势。在白细胞中,mi R-155和mi R-21表达均上调,其中,mi R-146a和mi R-181a在海兰褐鸡中均显著下调(P<0.05),但在AA+肉鸡中均显著上调(P<0.05)。在血浆中,2个品系雏鸡的mi R-146a和mi R-181a表达活性均显著下调(P<0.05)。为深入研究鸡NYGGF4基因的功能,首先对四个品系鸡的NYGGF4基因进行生物信息学分析,然后分析该基因的组织表达特性,最后验证该基因是否与炎症反应相关。实验结果表明:在四个品系鸡NYGGF4基因编码区内存在8个SNP位点。14日龄海兰褐雏鸡NYGGF4基因在脑中的表达量最高,而在AA+肉鸡的肺和脂肪组织中表达量最高,在其他组织中两个品系鸡都具有相似的表达特性。在炎症反应中,NYGGF4基因在海兰褐鸡和AA+肉鸡的肝脏和法氏囊中的表达活性表现出相反的变化。为深入研究成鸡输卵管炎的分子机制,本研究利用LPS制备海兰褐成年母鸡泄殖腔上行性感染急性炎症反应模型,并定量分析炎性组织相关基因的转录活性变化。实验结果表明:正常母鸡akirin2基因在输卵管各区段均高表达,而PPARγ基因仅在阴道和卵巢组织中具有较高表达活性。炎症反应中,akirin2基因在子宫、直肠和盲肠扁桃体中转录活性均显著上调,PPARγ基因仅在子宫中转录活性显著上调(P<0.01),而在直肠(P<0.01)和盲肠扁桃体中转录活性下调。本研究表明,akirin2、PPARγ和NYGGF4基因是影响炎症反应的重要调控基因,研究这些基因在炎症反应中的表达与调控关系,对于深入理解炎症反应分子机制具有重要的理论意义。此外,某些mi RNAs在炎症反应中的体液循环中变化显著,可能成为炎症诊断分子标记物的重要靶基因之一。
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