梅毒患者唾液和血液中梅毒螺旋体脱氧核糖核酸的检测及绝对定量研究

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本文主要从以下几方面展开论述:
  第一部分 梅毒患者唾液和血浆中梅毒螺旋体脱氧核糖核酸检出阳性率的比较研究
  目的:以巢式PCR方法检测各期梅毒患者唾液和血浆中梅毒螺旋体DNA(TP-DNA),并比较不同期梅毒患者唾液和血浆中梅毒螺旋体DNA的阳性率。
  方法:入组194例梅毒患者(包括一期梅毒32例,二期梅毒58例,潜伏梅毒66例和有症状神经梅毒38例),收集患者的唾液和血浆。同时收集30例非梅毒感染者的唾液和血浆作为对照。另外收集30例治疗后患者(治疗前唾液TP-DNA阳性)的唾液。用巢式PCR方法检测唾液及血浆中TP-DNA。用卡方检验比较不同组间的TP-DNA检出率,用Logistic回归分析影响唾液中TP-DNA检出率的相关因素。
  结果:唾液中TP-DNA的阳性率为41.75%(81/194),血浆中TP-DNA的阳性率为27.81%(52/187),唾液中TP-DNA的阳性率高于血浆(p=0.005)。一期梅毒、二期梅毒、潜伏梅毒和有症状神经梅毒患者唾液中TP-DNA检出率分别为34.38%、84.48%、21.21%和18.42%;一期梅毒、二期梅毒、潜伏梅毒和有症状神经梅毒患者血浆中TP-DNA检出率分别为50%、55.17%、7.58%和5.41%。除一期梅毒外,其他各期梅毒患者唾液TP-DNA检出率均高于血浆TP-DNA检出率。通过Logistical回归分析影响唾液中TP-DNA检出率的相关因素,与有症状神经梅毒患者相比,二期梅毒的OR值为13.11(95%CI3.18-54.07)(p<0.001);血浆TP-DNA阳性的OR值为3.56(95%CI1.22-10.36)(p=0.02);血RPR titer≥1:32的OR值为11.46(95%CI3.37-39.02)(p<0.001)。治疗结束后30例梅毒患者唾液中均未检测到TP-DNA。
  结论:在各期梅毒患者血浆和唾液中均能检测到TP-DNA,并且二期梅毒患者血浆和唾液的检出率最高。外周血RPR滴度、血浆中TP-DNA阳性和二期梅毒是影响唾液中TP-DNA的主要因素。
  第二部分 微滴式数字PCR检测唾液和血液中梅毒螺旋体脱氧核糖核酸绝对定量
  目的:分析各期梅毒患者唾液和血浆中TP-DNA的量及动态检测治疗过程中唾液TP-DNA的量的变化。
  方法:将第一部分巢式PCR检测为阳性的81例唾液和52例血浆样本进一步用微滴式数字PCR方法检测TP-DNA的量。收集6例梅毒患者治疗前和治疗后每间隔4小时的唾液,用巢式PCR和微滴式数字PCR方法对唾液中TP-DNA进行定性和定量检测。
  结果:唾液中PolA和Tpp47的拷贝数分别为0.073x104copies/ml(IQR(0.0040-0.50)x104copies/ml)和0.062x104copies/ml(IQR(0.0062-0.48)x104copies/ml)。血浆中PolA和Tpp47的拷贝数分别为19.8copies/ml(IQR0-37.4copies/ml)和17.6copies/ml(IQR0-41.8copies/ml)。二期梅毒患者polA和Tpp47拷贝数为0.29x104copies/ml(IQR(0.018-1.01)x104copies/ml)和0.33x104copies/ml(IQR(0.019-0.96)x104copies/ml)显著高于一期梅毒、潜伏梅毒和有症状神经梅毒(p<0.05)。6例随访患者治疗中唾液中polA和Tpp47的清除时间分别为68小时(IQR(37-89))和70小时(IQR(34-80))。
  结论:梅毒患者唾液中TP-DNA的量显著高于TP-DNA的量。治疗后唾液中的TP-DNA快速被清除。
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