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目的：重症急性胰腺炎（Severe acute pancreatitis，SAP）是一种以血流动力学改变和全身炎症反应为特征、死亡率高的疾病。SAP的发病机制至今尚未阐明，临床尚无有效的治疗措施。细胞因子的释放造成了全身性的反应，如：全身炎症反应综合症（systemic inflammatory response syndrome，SIRS）、多器官功能障碍综合征（multipie organ dysfunction syndrome，MODS）、成人呼吸窘迫综合征（adult respiratory distress syndrome，ARDS）、败血病等。此外细胞因子在作为SAP主要致死原因的多器官衰竭中起着轴心作用。关于细胞因子诱导SIRS的二次打击学说则解释了不同个体对SAP的多样性反应。银杏苦内酯B（Ginkgolide B，BN52021）是银杏叶提取物中重要的有效成分，对SAP具有治疗作用，是炎性介质血小板活化因子（Platelet activating factor，PAF）的强拮抗剂，具有抗炎、抗血栓和抗休克形成等多种药理作用，但其作用机制至今未明。PAF在体内主要通过特异性的血小板活化因子受体（Platelet activating factor receptor，PAF-R）将信号传递至细胞内，调节细胞的生命活动。PAF-R属于七次跨膜的G蛋白偶联受体家族，活化后偶联于特异性的异三聚体G蛋白，开启胞内相应的信号转导通路。
通过建立Wistar大鼠SAP模型，并以BN52021进行干预治疗，观察胰腺组织病理和检测血清淀粉酶，研究BN52021对大鼠SAP的影响、BN52021治疗大鼠SAP的最佳量效关系，以及Wistar大鼠SAP模型在应用BN52021治疗后对胰腺组织磷脂酶C-β2（phospholipase C-β2，PLC-β2）活性的影响。
方法：第一部分：采用180只雄性Wistar大鼠，体重200-250g，随机数字表法分为正常对照组（NC，n=60），SAP组（SAP，n=60）及BN52021治疗组（BN，n=60），每组再分为6个时相点（1h、2h、3h、6h、12h、24h），各组10只。用胰胆管插入逆行注射牛磺胆酸钠制备SAP大鼠模型；各组分别在处理后1h、2h、3h、6h、12h、24h麻醉并开胸和开腹，迅速采集心脏血液和胰腺组织。采用全自动生化分析仪检测血清淀粉酶，取一部分胰腺组织放入液氮速冻，——80℃超低温冰箱妥善保存；另一部分以中性缓冲甲醛固定（40g/L），石蜡包埋切片后HE染色制片，观察胰腺组织的病理学变化。
第二部分：Wistar大鼠70只，用随机数字表法分为假手术组（SO，n=10），SAP模型组（SAP，n=10），0.5％二甲基亚砜（DMSO）对照组（DMSO，n=10），2.5mg/kg BN52021治疗组（BN1，n=10），5mg/kg BN52021治疗组（BN2，n=10），10mg/kg BN52021治疗组（BN3，n=10），20μg/kg善宁治疗组（作为阳性对照）（SS，n=10），共七组。用药代动力学方法研究BN52021治疗大鼠SAP的最佳量效关系。
第三部分：第一部分中冻存的胰腺组织，用Western blot法检测PLC-β2的表达与激活，用Bio-Rad图像处理系统采集X线片的条带，用Quantity One图像分析软件进行条带灰度扫描。所有实验结果均用x±s表示，采用统计学SPSS软件进行
结果：第一部分：血浆淀粉酶结果显示，各时相点SAP组与NC组相比较显著升高（P<0.05），BN组也较NC组显著升高（P<0.05），但BN组在1h，2h，3h，6h和24h较SAP组显著降低（P<0.05）。病理学结果显示，SAP组随着时间的推移，胰腺及周围组织水肿、出血和坏死面积逐渐扩大，程度逐渐加重，而BN组较SAP组的组织结构破坏相对较轻，NC组胰腺及周围组织结构大致正常。
第二部分：血清淀粉酶、磷脂酶A2（phospholipase A2，PLA2）、腹水、胰腺组织病理学和胰腺组织PAF-R mRNA表达的结果显示在2.5mg/kg、5.0mg/kg、10.0mg/kg BN52021三个剂量中，5.0mg/kg BN52021给Wistar大鼠静脉注射治疗SAP具有最佳的量效关系（P<0.05）。
第三部分：1小时至3小时，NC组、SAP和BN组PLC-β2均于3小时降至最低点。6小时至24小时，NC组PLC-β2于6小时升至最高点，随后又逐渐降低；而SAP组PLC-β2于6小时至24小时逐渐升高。给予BN52021治疗后，6小时至24小时PLC-β2组在SAP组的基础上降低，且在12小时和24小时有统计学差异（P<0.01，P<0.01）。
结论：第一部分：逆行胰胆管内注射5％牛磺胆酸钠可以成功制备大鼠SAP模型，而且BN52021对SAP有一定的治疗作用。
第二部分：用5mg/kg BN52021静脉注射治疗Wistar大鼠SAP具有最佳的量效关系。
第三部分：BN52021能够部分抑制SAP胰腺组织中PLC-β2的活化，对SAP有明显治疗作用，其治疗SAP的机理可能与降低PLC-β2活性有关。
通过建立Wistar大鼠SAP模型，并以BN52021进行干预治疗，观察胰腺组织病理和检测血清淀粉酶，研究BN52021对大鼠SAP的影响、BN52021治疗大鼠SAP的最佳量效关系，以及Wistar大鼠SAP模型在应用BN52021治疗后对胰腺组织磷脂酶C-β2（phospholipase C-β2，PLC-β2）活性的影响。
方法：第一部分：采用180只雄性Wistar大鼠，体重200-250g，随机数字表法分为正常对照组（NC，n=60），SAP组（SAP，n=60）及BN52021治疗组（BN，n=60），每组再分为6个时相点（1h、2h、3h、6h、12h、24h），各组10只。用胰胆管插入逆行注射牛磺胆酸钠制备SAP大鼠模型；各组分别在处理后1h、2h、3h、6h、12h、24h麻醉并开胸和开腹，迅速采集心脏血液和胰腺组织。采用全自动生化分析仪检测血清淀粉酶，取一部分胰腺组织放入液氮速冻，——80℃超低温冰箱妥善保存；另一部分以中性缓冲甲醛固定（40g/L），石蜡包埋切片后HE染色制片，观察胰腺组织的病理学变化。
第二部分：Wistar大鼠70只，用随机数字表法分为假手术组（SO，n=10），SAP模型组（SAP，n=10），0.5％二甲基亚砜（DMSO）对照组（DMSO，n=10），2.5mg/kg BN52021治疗组（BN1，n=10），5mg/kg BN52021治疗组（BN2，n=10），10mg/kg BN52021治疗组（BN3，n=10），20μg/kg善宁治疗组（作为阳性对照）（SS，n=10），共七组。用药代动力学方法研究BN52021治疗大鼠SAP的最佳量效关系。
第三部分：第一部分中冻存的胰腺组织，用Western blot法检测PLC-β2的表达与激活，用Bio-Rad图像处理系统采集X线片的条带，用Quantity One图像分析软件进行条带灰度扫描。所有实验结果均用x±s表示，采用统计学SPSS软件进行
结果：第一部分：血浆淀粉酶结果显示，各时相点SAP组与NC组相比较显著升高（P<0.05），BN组也较NC组显著升高（P<0.05），但BN组在1h，2h，3h，6h和24h较SAP组显著降低（P<0.05）。病理学结果显示，SAP组随着时间的推移，胰腺及周围组织水肿、出血和坏死面积逐渐扩大，程度逐渐加重，而BN组较SAP组的组织结构破坏相对较轻，NC组胰腺及周围组织结构大致正常。
第二部分：血清淀粉酶、磷脂酶A2（phospholipase A2，PLA2）、腹水、胰腺组织病理学和胰腺组织PAF-R mRNA表达的结果显示在2.5mg/kg、5.0mg/kg、10.0mg/kg BN52021三个剂量中，5.0mg/kg BN52021给Wistar大鼠静脉注射治疗SAP具有最佳的量效关系（P<0.05）。
第三部分：1小时至3小时，NC组、SAP和BN组PLC-β2均于3小时降至最低点。6小时至24小时，NC组PLC-β2于6小时升至最高点，随后又逐渐降低；而SAP组PLC-β2于6小时至24小时逐渐升高。给予BN52021治疗后，6小时至24小时PLC-β2组在SAP组的基础上降低，且在12小时和24小时有统计学差异（P<0.01，P<0.01）。
结论：第一部分：逆行胰胆管内注射5％牛磺胆酸钠可以成功制备大鼠SAP模型，而且BN52021对SAP有一定的治疗作用。
第二部分：用5mg/kg BN52021静脉注射治疗Wistar大鼠SAP具有最佳的量效关系。
第三部分：BN52021能够部分抑制SAP胰腺组织中PLC-β2的活化，对SAP有明显治疗作用，其治疗SAP的机理可能与降低PLC-β2活性有关。