【摘 要】
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目的:乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,在我国其发病率逐年上升,目前已跃居我国女性恶性肿瘤的首位。斑蝥是传统中药,主要药用成分是斑蝥素,目前研究表明,斑蝥素对体外培养
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目的:乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,在我国其发病率逐年上升,目前已跃居我国女性恶性肿瘤的首位。斑蝥是传统中药,主要药用成分是斑蝥素,目前研究表明,斑蝥素对体外培养的多种肿瘤细胞有很强的促凋亡活性,如结直肠癌细胞、肝癌细胞、膀胱肿瘤细胞等。本课题旨在研究斑蝥素对体外培养人乳腺癌MCF-7细胞的杀伤作用,并对其作用机制进行初步探讨。方法:将处于对数生长期的MCF-7细胞以不同浓度的斑蝥素处理48h后,应用MTT比色法检测OD值,计算抑制率;应用流式细胞仪分析斑蝥素对细胞的凋亡率及周期影响;应用免疫荧光技术检测细胞Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:1. MTT结果:斑蝥素对乳腺癌MCF-7细胞生长有明显的抑制作用,并随浓度增大而增加,浓度100μmol/L的抑制率最大,为68%,IC50是30.5μmol/L。2.流式细胞仪结果:AnnexinⅤ-FITC标记法结合流式细胞仪检测细胞凋亡率显示12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L浓度下细胞凋亡率分别是27.91%、36.12%、63.53%,与对照组0.87%比较均有显著性差异(P﹤0.05)。DNA直方图上加药组G1峰前出现明显的亚二倍峰;同时随药物浓度增高,处于G1期的细胞逐渐减少,而处于S期的细胞逐渐增加。3.免疫荧光结果:随着斑蝥素药物浓度的增高,Bcl-2的荧光强度越来越弱,而Bax则恰恰相反,其荧光强度越来越强。结论:斑蝥素对人乳腺癌细胞株MCF-7存在明显的生长抑制作用和诱导凋亡作用,其凋亡机制可能与下调Bcl-2、上调Bax基因表达有关。
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