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手性配体交换色谱(CLEC)是CSP-HPLC中的一个重要分支,是拆分手性化合物特别是氨基酸和羟基酸对映体的一种有效方法。采用长链烷烃取代光活性氨基酸作为手性选择子,由于疏水作用,手性选择子牢固地固定在反相C18硅胶柱上,可以有效的拆分氨基酸对映体且柱效较高。
本实验合成了2-(2-羟基十六烷基)-(S)-1,2,3,4-四氢-3-异喹啉羧酸手性选择子,采用动态涂渍方法,制备了一种涂渍于ODS柱上的新型手性配体交换色谱固定相。采用醋酸铜水溶液为流动相,在柱温25℃和UV254nm检测条件下,拆分了16种DL-氨基酸,其对映体选择性α和分离度Rs分别在1.09~1.67和1.0~4.8之间,并观察到D-异构体在先、L-异构体在后的色谱流出顺序。讨论了柱温、流动相的流速、Cu2+浓度、pH值、NH4+和甲醇对DL-氨基酸对映体拆分的影响。
为了改善某些DL-氨基酸,如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸的保留,合成了L-脯氨酸、L-酪氨酸衍生物手性选择子,并涂渍于ODS固定相上,考察对氨基酸对映体的分离效果。
根据三点作用模型,探讨了氨基酸对映体在手性配体交换色谱固定相上的拆分机理,讨论了氨基酸的结构对拆分的影响以及氨基酸对映体色谱拆分的热力学和动力学。