系统性红斑狼疮患者激素耐药机制及中药干预逆转的研究

• 作 者: 杨军锋
• 机 构: 浙江中医药大学
• 出 处: 浙江中医药大学
• 发表日期: 2009年期
• 关键词: 系统性红斑狼疮 激素耐药 P糖蛋白 葛根素 三七皂苷

目的：　　探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血淋巴细胞激素耐药以及中药有效成分葛根素、三七皂苷逆转耐药作用的机制；研究能抑制SLE患者外周血淋巴细胞P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）高表达的中药，为临床提供逆转激素耐药、提高治疗敏感性的新思路和新方法。　　方法：　　利用密度梯度离心法分离单个核细胞，用贴壁培养去除单核细胞以纯化淋巴细胞，并悬浮培养；以四唑盐比色法（MTT）筛选葛根素、三七皂苷(PNS)、异搏定(VER)对淋巴细胞的最高非细胞毒浓度（细胞存活率﹥90％）作为干预浓度，并用此法测定甲基强的松龙（MP）诱导淋巴细胞凋亡的最佳浓度；以葛根素、三七皂苷作为逆转激素耐药的中药制剂，异搏定作为对照组，流式细胞术检测分离培养的淋巴细胞 P-gp及Annexin V表达以及健康志愿者和SLE患者外周全血淋巴细胞P-gp表达；用SLEDAI标准评分SLE患者疾病活动性，分析P-gp表达与SLEDAI积分相关性。　　结果：　　1.SLE患者外周血淋巴细胞 P-gp表达显著高于健康志愿者，并且与疾病活动性显著相关；　　2.葛根素（80ug/ml）、三七皂苷（200ug/ml）可显著下调SLE患者外周血淋巴细胞 P-gp的高表达，作用强于异搏定；　　3.葛根素、三七皂苷能进一步增强甲强龙诱导的SLE患者外周血淋巴细胞的凋亡；　　4.在葛根素、三七皂苷干预前后，激素诱导的SLE患者外周血淋巴细胞P-gp表达与Annexin V呈显著负相关，异搏定干预前后两者两者之间未显示出显著的相关意义。　　结论：　　1.P-gp介导的多药耐药是SLE患者激素耐药的重要机制之一；　　2.葛根素、三七皂苷可显著下调SLE外周血淋巴细胞P-gp高表达；　　3.葛根素、三七皂苷可协同激素增强诱导淋巴细胞凋亡的作用，对SLE患者外周血淋巴细胞激素耐药有显著逆转作用；　　4.葛根素、三七皂苷与竞争性钙通道阻滞剂（异搏定）逆转耐药机制不同，有待进一步研究。