在人类胚胎干细胞中建立基于CRISPR-Cas9系统的可诱导的基因筛选和基因调控平台

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从早期胚胎分离出来的人类胚胎干细胞具有自我更新、快速增殖及分化成全部成体细胞类型的能力。对人类胚胎干细胞进行基因编辑和研究人类胚胎干细胞中转录调控网络对于了解胚胎干细胞定向分化机制、实现疾病治疗和器官再生等都有着重大的意义。CRISPR-Cas9系统是一种基因编辑工具,其出现和发展推动了人类胚胎干细胞中基因功能的研究。  本研究中,一方面我们在人类胚胎干细胞中引入四环素调控系统,进而建立了可诱导的基因编辑平台,为筛选与维持人类胚胎干细胞多能性相关转录因子摸索了实验条件。另一方面,我们将Casilio系统引入人类胚胎干细胞中,建立了可诱导的多基因表达调控平台。利用该平台,我们在人类胚胎干细胞中成功实现了同时对于内源SOX17基因的激活和OCT4基因表达的抑制,表明可以对于包含多个基因的转录网络进行调控。  综上所述,我们在人类胚胎干细胞中建立了可诱导的基因筛选平台和多基因的转录调控平台,为推动人类胚胎干细胞中基因功能和转录调控网络的研究打下基础。
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