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本教研室以往的研究已证实：传递三叉神经本体感觉信息的中枢通路为存在于三叉神经中脑核(mesencephalic trigeminal nucleus，Vme)和丘脑腹后内侧核(ventral posteromedial nucleus，VPM)之间的分别由三级和四级神经元组成的两条平行通路。在该通路中，谷氨酸(glutamate，Glu)是主要的兴奋性神经递质，小白蛋白(parvalbumin，PV)是主要的钙结合蛋白，它们在口面部本体感觉信息的传递中起着重要作用。 磷酸激活的谷氨酰胺酶(phosphate activated glutaminase，PAG)能催化水解谷氨酰胺产生Glu和氨，是中枢Glu的主要来源。目前PAG已被用作研究Glu能神经元的特异性标识物。PV是生物体内的一种钙结合蛋白，在躯体和三叉神经本体觉通路中大量表达。尽管其功能目前还存在争议，但是许多研究已经证实在发育过程中PV的表达与神经元的功能成熟相一致。脑内特殊的Na~+依赖的无机磷酸转运体(brain-specific Na~+-dependent inorganic phosphate transporter,BNPI)是一种囊泡膜谷氨酸转运体，已被命名为Ⅰ型囊泡膜谷氨酸转运体(vesicle glutamate transporter of type 1，VGluT1)。最近的研究表明：VGluT1主要分布于脑内大部分非对称性突触的突触前囊泡膜上，而在对称性突触的突触前囊泡膜上没有分——布。因此，VGlllTI可作为谷氨酸能神经终末的特异性标记物。 三叉神经本体觉中枢通路传递口面部的空间位置信息和闭口肌的运动信息，参与调控吮吸、吞咽、咀嚼和发音等重要活动。众所周知，在发育过程中这些活动日新月异，其本质之一就是精确的运动调控模式的建立，其中成熟的三叉神经本体觉中枢通路的建立至关重要。形态学和电生理研究表明谷氨酸能神经元在该通路中起关键作用。由于三叉神经本体觉中枢通路为新发现的一条通路，有关发育过程中该通路内神经元的功能成熟时程，特别是mU能神经元的功能成熟时程，到目前为止尚未见报道。 基于上述问题，本研究运用免疫组织化学、免疫荧光组织化学双重染色方法对发育过程中大鼠三叉神经本体觉中枢通路中PAG、PV样阳性神经元和 VGluTI样阳性终末的分布和发育，以及VGluTI样阳性终末与PAG或PV样阳性神经元之间的联系进行了系统的研究。 第一邵分 大鼠脑干内三叉神经本体觉中枢通路中PV 样阳性神经元的分布和发育 本研究应用兔疫组织化学方法对大鼠脑干内三叉神经本体觉中枢通路中PV样阳性神经元的分布和发育进行了观察。结果如下：①早在胚胎门天时，首先在 Vine内观察到 PV样阳性神经元，主要为大的假单极神经元，呈中等阳性反应。生后3天，Vine内PV样阳性神经元的数量明显增多，免疫反应呈强阳性。②生后10天，三叉神经脊束核吻侧亚核背内侧部（the dorsomedial part of the subnucleus oralls of the snlnal trlsemlnal nucleus，Vodm）及三叉神经感觉主核背内仅部（the dorsomedial ＂art of the PrinciPal 2 第四军医大学硕士学位论文sensory trigeminal nucleus，Vpdm）均出现少量中等强度的 pV样阳性神经元；生后 14天，三叉神经脊束核吻侧亚核邻接的外侧网状结构（the lateralreticular．formation，LRF），二叉上核尾夕侧部（the caudolateral part of thesupratrigeminal nucleus，Vsup－CL），二叉神经W动核腹仅区（are ventral to themotor trigeminal nucleus，AVM）及上橄揽核背狈区（area dorsal to the superiorolivery nucleus；ADO）均出现PV样阳性神经元。③生后ZI 天，Vodm－LRF区及由 VPdffi、VSllPCL、ADO和 AVM组成的‘滞状区’内 PV样阳性神经元及纤维的分布均达成年水平。 以上结果提示：Vine内 PV样阳性神经元的功能成熟发生于胚胎门天到生后3天，而Vodm－LRF和“带状区”内PV样阳性神经元的功能成熟则发生于生后10天到ZI天。 第二部分 大鼠脑干内三叉神经本体觉中枢通路中PAG 样阳性神经元的分布和发育 为了探明大鼠脑干内三叉神经本体觉中枢通路中＊ 能神经元的功能成熟时程，本研究应用免疫组织化学方法对PAG样阳性神经元的分布和发育进行了观察。结果显示：①于胚胎 17天，首先在 Vine内观察到 PAG样阳性神经元，胞体大，呈中等强度免疫阳性，随着发育其免疫阳性逐渐增强，并于生后 10天达到成年水平。＠在二级和三级核团内，直到生后m天才在AV M和ADO内观察到中等强度的PA G样阳性神经元；在生后12天，VOdm和 Vpdm内也观察到 PAG样阳性神经元。③随着发育进展，二级和三级核团内越来越多的神经元呈 PAG样免疫阳性，并于生后 ZI天， 3 第四军医大学硕士学位论文——在 LRF禾 VSllP＊L内观察到 PAG样阳性神经元。 山?