草莓β-1,4-葡聚糖酶基因的克隆与遗传转化

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a76s333
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
草莓(Fragaria ananassa Duch)属于蔷薇科(Rosaceae)多年生草本植物。其果实营养丰富,鲜美多汁,具有很高的营养价值和经济价值。但草莓不耐贮运,草莓果实采摘后的贮运保鲜仍是目前生产实践中亟待解决的一大难题。另外,在草莓生产中多采用无性繁殖,经多年栽培后,很容易感染多种病毒,致使种性严重退化、产量降低、品质变劣和抗性降低等。因此,如何改善草莓品质和提高其抗病性已越来越受到人们的关注。近年来飞速发展的现代生物技术为草莓品种遗传改良提供了新途径。 本研究以目前国内主栽品种丰香和章姬为试材,较为系统地研究了影响草莓离体再生的诸多因素,如外植体类型、外源激素种类、外植体生理状态等,建立了草莓叶片高效离体再生体系,从而为草莓的遗传转化研究与应用奠定了基础。试验结果表明:不同激素组合及配比对草莓叶盘不定芽再生有不同的影响。TDZ对芽再生的效果明显比6-BA强,丰香叶盘在MS+TDZ2.0mg/L+2,4-D0.1mg/L+IBA0.2mg/L分化培养基上芽再生频率可达83.2%,平均每叶盘再生芽数达1.4个;章姬则在MS+TDZ4.0mg/L+NAA0.1mg/L+IBA0.2mg/L分化培养基上芽再生频率可达65.7%,平均每叶盘再生芽数为1.3个。同一基因型草莓叶盘再生效果比叶柄好,而其中又以10d左右叶龄的叶片再生能力最高。8.0mg/L AgNO3能较好地控制外植体的褐化,促进芽的分化。再生芽在1/2MS+IBA0.1mg/L生根培养基中,生根率达100%。本文还对草莓花药离体培养进行了研究,筛选出适合草莓赵屯一号品种花药培养最佳诱导愈伤组织培养基,即F+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+CH300mg/L,并成功诱导出再生芽获得再生植株。这为草莓花药脱毒培养和将来利用花药进行目的基因遗传转化研究提供了理论依据。 为了研究β-1,4-葡聚糖酶基因在草莓果实成熟过程中的作用及探讨利用β-1,4-葡聚糖酶反义基因培育耐贮草莓新品种,从草莓果实中提取总RNA,根据Gen Bank中β-1,4-葡聚糖酶基因FaEG1和FaEG3序列设计合成特异性引物,利用RT一PcR技术分别扩增了两个基因1 491bp和1863bp的cDNA,反向插入到植物表达载体PROKZ中,将该载体转入农杆菌AGL一I中,构建了石hEGI和卢h百G了的反义基因的表达载体。通过农杆菌介导法转化草墓品种丰香和章姬后,从104块抗卡那霉素转化愈伤中随机抽取24块经PCR检测,其中17块扩增出目的带,PCR阳性率为70.8%,初步证实这两个基因整合到草葛染色体基因组中,抗Kan愈伤现已分化形成12个转化芽。试验通过对农杆菌转化前外植体预培养、农杆菌侵染时间及转化后外植体共培养等方面的探索发现,农杆菌介导的草荀基因遗传转化的最佳条件为:预培养1d一共培养3d,农杆菌侵染时间为巧一ZOmin效果最好。
其他文献
根据克雷顿·克里斯汀生的"破坏性创新"理论以及从中归纳出的"技术的非竞争性"、初始阶段的低端性、易获得性以及消费者价值导向性四个特点,可以得出金融科技是破坏性创新的
"同命不同价"这一现象所反映出的我国户籍制度下的双重计算标准,在设计和构建上符合我国国情,具备理论上的正当性。之所以引起社会舆论的热议和质疑,究其原因是因为各级法院
近年来我国外汇储备持续增加,引起银行流动性过剩。本文在对相关文献进行综述的基础上,分析了银行流动性过剩对房地产市场的影响,并对如何降低房地产市场的风险提出了建议。
本文分析了公允价值和公允价值审计这两个概念,并从注册会计师的视角对公允价值审计的主要内容和加强公允价值审计的对策作了探讨,以期为公允价值审计在我国的开展提供参考。
金融科技(Fin Tech)是技术驱动的金融创新。近年,金融科技的出现及其应用,使金融体系出现了新的改变,并为我国金融发展提供了新的发展途径。中国是全球最大的移动互联网市场,
本研究以生产上广泛栽培的“丰香”、“红丰”等几个草莓品种为试料,就影响其植株再生的有关因子,包括培养基和基因型、基本培养基、供体试管苗状态、接种方式、继代天数、暗培
在MS培养基基础上,以不同激素配比对草莓优良品种美国童子一号进行了丛芽诱导及生根壮苗影响的研究。实验结果表明:MS+BA1.6mg/L+NAA0.2mg/L丛芽诱导效果显著,诱导增殖率较高
本文从我国城市幼儿体育人力资源的现状及主要问题出发,探讨了公办、民营、私营幼儿园体育人力资源的开发与管理对策,以期促进当前城市幼儿体育教育发展。
云降水的宏微观物理特征的观测和研究,有助于建立典型的云降水多尺度结构模型,为确定科学的人工增雨催化方案提供重要依据。借助于雷达、卫星等多种遥感探测手段,结合飞机的
研究了冷却水水温对影响S195柴油机功率、耗油率测试结果的影响,找出了适宜的冷却水温度范围,从而为制定小型拖拉机功率和耗油率测试规范提供了依据。