酶解提取松针粉挥发油和葛根黄酮的研究

来源 :安徽农业大学 | 被引量 : 8次 | 上传用户:yeyuxx008
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本试验应用了两种酶解处理方法研究了酶解对中草药类饲料添加剂松针粉和葛根的有效成分挥发油和黄酮溶出率的影响,并应用色谱法对酶解前后提取物进行了对比分析。试验研究了以高活性纤维素酶、果胶酶、蛋白酶等组成的复合酶制剂对松针粉和葛根进行酶解处理再进行常规提取,并测定其有效成分挥发油和黄酮的提取量。以提取量为参照值,采用单因素及正交设计方法优化了复合酶解提取的最佳反应条件:酶解温度50℃,pH=4.5,酶解作用时间6h,最适加酶量为4%。试验结果表明:在最优酶解条件下松针粉挥发油和葛根黄酮的提取率分别提高了37.9%和26.3%。经t检验分析,两种中草药有效成分加酶后的提取量显著提高(P<0.001)。研究结果说明在最佳酶解条件下,应用复合酶解法提取松针粉和葛根,有效成分的提取率能得到显著性提高。试验利用产高活性纤维素酶、果胶酶、蛋白酶的黑曲霉ANO2鲜曲酶解处理提取松针粉和葛根。对酶解条件进行了优化,确定黑曲霉酶解法提取松针粉和葛根的最佳条件为:温度40℃,pH=4.0,酶解作用时间和加霉量分别为6h和6%。试验结果表明:在最优酶解条件下,松针粉挥发油的提取率提高了34.3%,葛根黄酮的提取量提高21.1%;经t检验分析,两种中草药有效成分加霉后提取量显著提高(P<0.01);研究表明在最佳酶解条件下,黑曲霉ANO2鲜曲能显著的提高松针粉和葛根有效成分的释放提取,且与复合酶法相比更经济方便。试验应用色谱法对松针粉和葛根酶解前后提取物进行了鉴别。薄层层析结果表明酶解提取前后挥发油和黄酮色谱带基本一致,且各提取物与标准品展点在同一水平线上;气相色谱结果表明松针油标准品出现的较大波峰在同一时间值其它三个提取物中也出现一样的较大波峰,且三个提取物的色谱图基本上完全相同;高效液相色谱结果表明标准品的最大波峰和其它三个提取物的最大波峰基本出现在同一时间,且四个最大波峰的紫外吸收光值都在700~800mAU之间。从几种色谱分析结果可知:酶解前后提取物和标准品含有相同的成分,酶解处理对提取产物没有影响。
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